耐药癫痫患者脑内EMP-1的异常表达及其对AED耐药性形成机制的探讨

摘要

上皮膜蛋白-1（Epithelial membrane protein-1，EMPl），又称为肿瘤相关蛋白（Tumor-associated membrane protein，TMP），是耐药肿瘤的标志物。通过对表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor，EGFR）的作用，参与了肿瘤的耐药机制。由于耐药性肿瘤与耐药性癫痫在耐药机制中存在某些相似性，EMP1可能与癫痫的耐药机制也存在某种关联。 目的:研究上皮膜蛋白-1（EMP1）在耐药性癫痫患者脑组织的表达，探讨其在耐药性癫痫发生及发展中的作用。 方法:收集耐药性癫痫和正常对照脑组织，按随机化原则，从中抽取36例组成DRE组和16例组成对照组。我们通过基因芯片和免疫组化的方法来检测EMP1的表达，同时，通过免疫荧光双标的方法，检测EMP1与EGFR是否表达在同一细胞上，探讨两者之间的关系。 结果:在基因芯片中，我们发现EMP1mRNA在耐药性癫痫中表达上调。通过免疫组化的结果，表明EMP1蛋白明显表达在耐药性癫痫的神经元上，而在对照组中未见其表达。并通过免疫荧光双标，EMP1和EGFR共同表达在同一神经元上。 讨论我们证实了在耐药性癫痫中脑内EMP1表达上调，在同一神经元上EMP1和EGFR共同表达，二者相互作用，可使EGFR不受AEDs的影响，而持续激活下游通路，造成癫痫的耐药；EMP1也可通过影响其他相关蛋白表达及信号通路，导致突触重塑，形成兴奋环路，癫痫持续放电而形成耐药。另外，EMP1对血脑屏障转运的抑制作用，也可阻止AEDs进入脑组织，降低药物浓度，造成癫痫耐药。因而，EMP1是导致耐药性癫痫形成一个新的耐药基因，其表达上调可作为癫痫耐药的新标志物。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英汉缩略语名词对照

声明

前言

1材料和方法

1.1材料

1.1.1临床资料

1.1.2主要仪器和设备

1.1.3主要试剂及配置

1.2实验方法

1.2.1样本的准备

1.2.2基因芯片扫描

1.2.3免疫组化

1.2.4免疫荧光

1.3图像采集和数据分析

2结果

2.1临床资料分析

2.2基因芯片扫描

2.2.1总RNA提取结果

2.2.2基因芯片扫描结果

2.2.3免疫组化和免疫荧光结果

3讨论

全文总结

参考文献

附图

文献综述 难治性癫痫耐药机制的研究进展——源于肿瘤耐药的启发

致谢

攻读硕士学位期间待发表的论文