分析谷丙转氨酶-乳酸脱氢酶偶联反应动力学过程测定谷丙转氨酶活性

摘要

本文比较经典初速度法、数值积分速度方程分析偶联酶反应过程与初速度法联用法及最大瞬时速度法分析ALT-LDH偶联反应测定ALT活性；通过分析模拟数据、纯化ALT反应数据及临床血清标本反应数据，考察各方法测定ALT活性的线性范围，结果如下： 1）.确定了用数值积分速度方程分析ALT-LDH反应过程测定ALT活性的数据处理方法。据非稳态偶联酶反应动力学方程，设定参数的组合，数值积分计算对应的反应曲线，用于拟合实验反应曲线计算残差平方和；在合理范围内逐步优化所需参数的组合，得到给出最小残差平方和的参数组合为此积分法所得参数。 2）.分析模拟数据发现，联用法和最大瞬时速度法分析此偶联酶反应体系测定ALT活性的线性上限都优于经典初速度法；当工具酶成本为次要因素时，最大瞬时速度法因计算量小而更实用；当工具酶成本为限制因素时，联用法比初速度法更有优势但计算量大。 3）.分析纯化ALT-LDH偶联反应数据发现，联用法与最大瞬时速度法的线性范围都优于经典初速度法；对大量血清标本（n=100），此联用法所得ALT活性与经典初速度法紧密正相关，且Bland-Altman分析表明两种方法所得ALT活性一致。 因此，此联用方法和最大瞬时速度法可能更适用于分析偶联LDH的反应过程测定ALT活性。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:英汉缩略语名词对照

声明

前言

第一部分 分析ALT-LDH反应过程测定ALT活性理论基础和模拟数据分析

1 ALT-LDH反应动力学和数据处理方法

2 结果与讨论

第二部分 不同方法分析偶联LDH反应过程测定纯化ALT活性的线性范围

1 材料与方法

2结果

3讨论

第三部分 不同方法分析偶联LDH反应过程测定临床血清ALT的比较

1材料与方法

2结果与讨论

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文