葡萄籽原花青素对人卵巢癌耐药细胞COC1/DDP增殖抑制作用及机制研究

摘要

目的：观察葡萄籽来源的原花青素(GSPE)对人卵巢癌耐药细胞COC1/DDP的增殖抑制作用,并初步探讨其机制。
　　 方法：(1)在第一部分实验中,细胞培养细胞形态观察,HE染色观察细胞形态变化,MTT法检测不同浓度葡萄籽来源的原花青素(0、20、40、80、160、320μg/ml)不同时间(24、48、72h)对COC1/DDP的增殖抑制作用,测定抑制率。(2)在第二部分实验中,流式细胞仪和 TUNEL检测各浓度GSPE作用后细胞凋亡情况,Western-blot和RT-PCR检测细胞内Caspase-3,bcl-2,bax基因的表达情况。
　　 结果：经GSPE作用后,COC1/DDP细胞体积变小,边缘皱缩,胞浆内颗粒物质增多；HE染色观察发现GSPE能引起明显的细胞凋亡形态改变,在相同作用时间下,药物浓度越高,形态改变越明显；经MTT试验和细胞生长抑制率测定,GSPE对COC1/DDP有明显的增殖抑制作用,而且这种抑制作用随着其浓度的增大和作用时间的延长而增强,。流式细胞术和TUNEL表明GSPE可以诱导细胞凋亡,且随着药物浓度增加,凋亡率升高。Western blot和RT-PCR检测显示随着药物浓度增加,Caspase-3和bax蛋白表达增加,bcl-2的表达下降。
　　 结论：葡萄籽原花青素在体外对人卵巢癌耐药细胞COC1/DDP有明显的增殖抑制作用,并能诱导其调亡,增加Caspase-3和bax蛋白表达,降低bcl-2的表达。GSPE诱导人卵巢癌耐药细胞COC1/DDP凋亡的其机制可能与增强Caspase-3表达和上调bax/bcl-2比例有关。