调控缺氧诱导因子-1α对缺氧胃癌细胞侵袭转移的影响

摘要

目的:构建HIF-1a shRNA真核表达载体,研究缺氧诱导因子-1α与缺氧胃癌细胞侵袭的关系,探讨其影响缺氧状态下胃癌细胞侵袭能力的可能机制。
　　 方法:构建HIF-1a shRNA真核表达载体传染SGC-7901细胞,Western blot检测HIF-1a RNA干扰效果,挑选最佳质粒重新转染并筛选出HIF-1a RNA干扰稳定转染株。采用Western blot、MTT法、游走实验及侵袭实验观察不同氧状态与HIF-1a RNA干扰对HIF-1a表达的改变及胃癌细胞粘附、游走、侵袭能力的影响。采用Western blot检测缺氧与HIF-1a RNA干扰对HIF-1a及胃癌侵袭转移相关因子MMP-9和uPAR表达的影响。
　　 结果:HIF-1a shRNA真核表达载体构建成功。缺氧状态下HIF-1a的表达及人胃癌细胞系SGC-7901细胞的粘附、游走及侵袭能力均显著增加；HIF-1a RNA干扰后HIF-1a的表达及人胃癌细胞系SGC-7901细胞的粘附、游走及侵袭能力显著下降。缺氧状态下HIF-1a、MMP-9及uPAR的表达显著升高；HIF-1a RNA干扰后,HIF-1a、MMP-9及uPAR的表达显著降低。
　　 结论:缺氧能上调HIF-1a的表达,从而增强胃癌细胞的粘附、游走及侵袭能力,其机制可能与HIF-1a上调MMP-9和uPAR的表达有关。HIF-1a RNA干扰能明显减弱这一过程。