丹参酮ⅡA磺酸钠预处理对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞fractalkine表达及其凋亡的影响

摘要

实验一高糖诱导人脐静脉内皮细胞fractalkine表达及其凋亡的研究
　　 目的:
　　 探讨高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical veinendothelial cell,HUVECs)fractalkine(FKN)表达与细胞凋亡的可能机制。
　　 方法:
　　 对数生长期的HUVECs,分为正常组(N),高糖组(HG),氯化锂(lithium chloride,LiCl)组(LiCl),高糖+LiCl组(HG+LiCl)。5.5mmol/L的低糖DMEM培养的HUVECs种板10 h后按以上分组加入10 mmol/L的LiCl预处理2h,再用33.3 mmol/L的高糖干预48 h后,用TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化SABC法检测β-catenin及p-GSK-3β(Ser9)、免疫荧光FITC法检测FKN蛋白水平变化,RT-PCR检测GSK-3β和FKN mRNA水平变化。
　　 结果:
　　 ①与正常组比较,高糖诱导的HUVECs凋亡率明显增加(P＜0.05)。与高糖组比较,LiCl可明显降低高糖环境下HUVECs的凋亡率(P＜0.05),但仍高于正常组(P＜0.05);②与正常组比较,高糖组HUVECsβ-catenin及p-GSK-3β(Ser9)(P＜0.05)蛋白表达降低;GSK-3βmRNA水平(P＜0.05)及FKN蛋白和mRNA水平(P＜0.05)升高。③与高糖组比较,LiCL+高糖组HUVECsβ-catenin及p-GSK-3β(Ser9)蛋白表达升高(P＜0.05),GSK-3βmRNA水平(P＜0.05)及FKN蛋白和mRNA(P＜0.05)水平降低。
　　 结论:
　　 高糖诱导的HUVECs凋亡可能与Wnt信号通路抑制和FKN表达上调有关。
　　 实验二丹参酮ⅡA磺酸钠预处理对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞fractalkine表达及调亡的影响
　　 目的:
　　 探讨丹参酮Ⅱ A磺酸钠(sodium tanshinoneⅡ A sulfonate,STS)预处理对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelialcells,HUVEC)fractalkine(FKN)表达的影响及其可能机制。
　　 方法:
　　 对数生长期的HUVECs,分为正常组(N),高糖组(HG),STS组(STS),高糖加STS组(HG+STS),高糖加STS与氯化锂组(HG+STS+LiCl),5.5mM的低糖DMEM培养的HUVECs种板lOh后按以上分组加入5mg/L的STS和/或10 mM的LiCl预处理2h,再用33.3 mM的高糖干预48h后,免疫组化SABC法检测β-catenin及p-GSK-3β(Ser9)、免疫荧光FITC法检测FKN蛋白水平变化,RT-PCR检测GSK-3β和FKN mRNA水平变化。
　　 结果:
　　 与正常组比较,高糖组FKN蛋白及mRNA水平(P＜0.05),GSK3βmRNA水平(P＜0.05)明显增加,β-catenin及p-GSK-3β(Ser9)蛋白表达(P＜0.05)降低;与高糖组比较,STS组FKN蛋白及mRNA水平(P＜0.05),GSK3β mRNA水平(P＜0.05)明显降低,但仍高于正常组,β-catenin及p-GSK-3β(Ser9)蛋白表达(P＜0.05)增加,但仍低于正常组;STS与氯化锂共同预处理后以上改变更明显(P＜0.05)。
　　 结论:STS抑制HUVEC FKN表达可能与Wnt信号通路有关。