舌鳞癌细胞微环境对小鼠树髓源性树突状细胞生长分化影响

摘要

目的:利用不同剂量的人舌鳞癌细胞Tca8113培养上清液模拟肿瘤发展不同时期肿瘤微环境对小鼠髓源性树突状细胞生长分化及功能的影响,并探讨其发生的可能机制。
　　 方法:利用无菌小鼠长骨骨髓细胞,对照组在常规重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白介素-4(rmIL-4)培养液中培养,诱导分化为DCs;实验组在上述培养液中再加入不同剂量的舌鳞癌细胞株Tca8113培养上清液。培养第六天收集各组悬浮细胞,部分细胞台酚蓝染色法计活细胞数,流式细胞术检测DCs表型(CD86、CD11c、MHC-Ⅱ)表达;部分细胞加入LPS观察其对外源性刺激的反应,流式细胞术检测经LPS刺激后DCs表型CD86、CD11C、MHC-Ⅱ表达,混合淋巴细胞增殖实验比较其在体外刺激T淋巴细胞增殖能力
　　 结果:tca8113微环境下可诱导培养出具有典型形态和免疫表型的树突状细胞:低剂量tca8113培养上清液微环境刺激增强刺激DCs成熟,中等剂量tca8113培养上清液微环境不影响DCs成熟,但能促进骨髓前体细胞分化为imDC;高剂量tca8113培养上清液微环境抑制DCs分化成熟;中等剂量cs-tca8113微环境下诱导imDC具有抵抗外源性抗原刺激成熟能力。
　　 结论:成功建立舌鳞癌微环境下树突状细胞诱导分化模型;舌鳞癌微环境对树突状细胞分化影响的多样性可能与环境中免疫因子浓度密切相关。