L-精氨酸激活人肝细胞中内源凝血因子Ⅷ的表达

摘要

目的：利用L-精氨酸加入人肝细胞LO2培养基中，观察LO2中内源凝血因子Ⅷ(coagulation factorⅧ，FⅧ)的表达情况，研究L-精氨酸激活LO2中内源FⅧ表达的调控机制。
　　方法：将LO2分为实验组和对照组，实验组加入L-精氨酸(终浓度为10mmol/L)分别培养24、36、48和60h，对照组用同体积灭菌水取代L-精氨酸培养。用RT-PCR方法检测LO2中人FⅧ基因的转录水平并测序鉴定，一期法检测细胞培养上清液中的人FⅧ促凝活性(FⅧ：C)，Western blot分别检测作用24、48h后LO2中人FⅧ基因的表达，免疫荧光染色结合激光共聚焦显微镜观察作用48h后LO2中人FⅧ的表达。
　　结果：RT-PCR显示，加L-精氨酸培养36、48、60h后，LO2中有人FⅧ mRNA的转录，而对照组未出现人FⅧmRNA的转录；一期法检测各组细胞上清液中人FⅧ：C差异均无统计学意义(P>0.05)：Western blot及激光共聚焦均观察到加L-精氨酸培养48h后LO2中出现人FⅧ的表达，而对照组的细胞中均未有人FⅧ的表达。
　　结论：L-精氨酸可激活人正常肝细胞中内源人FⅧ的表达，其调控的机制有待进一步研究。