产前使用地塞米松影响坏死性小肠结肠炎新生鼠Toll样受体4表达的初步研究

摘要

第一部分产前使用地塞米松对新生鼠肠道发育及Toll样受体4表达的影响
　　目的：探讨产前使用地塞米松对新生SD大鼠小肠发育及肠道Toll样受体4(Toll-like receptor 4，TLR4)表达的影响。
　　方法：12只成年SD孕鼠随机分为正常对照组、产前地塞米松干预组(dexamethasone，DEX组)、产前生理盐水干预组(normal saline，NS组)三组，每组4只，于孕16、17、18天时，DEX组孕鼠肌肉注射地塞米松(0.5mg/(kg·d))，NS组孕鼠肌肉注射生理盐水(0.3ml/d)。正常对照组不予处理。各组孕鼠自然分娩(n=22天)。于第1、3、5天时处死各组新生鼠，称量小肠重量及长度；取近回盲部肠组织做病理切片，采用HE染色观察测量肠绒毛高度，免疫组化法检测TLR4蛋白表达；其余小肠部分荧光实时定量PCR法检测其TLR4 mRNA的表达。
　　结果：
　　(1)各组新生大鼠随鼠龄增加，小肠长度逐渐增长，小肠重量逐渐增重，肠绒毛高度逐渐增高，小肠TLR4蛋白和mRNA表达逐渐减少。
　　(2)1、3日龄时，DEX组新生鼠小肠长度及重量显著高于正常对照组及NS组(P<0.05)。
　　(3)1、3、5日龄时，DEX组小肠绒毛高度显著高于其他两组(P<0.05)，DEX组新生鼠小肠TLR4蛋白和mRNA表达显著低于其他两组(P<0.05)。
　　(4)正常对照组与NS组比较，各时间点小肠长度与重量、肠绒毛高度及肠道TLR4表达无显著性差异(P>0.05)。
　　结论：产前地塞米松的使用可促进新生鼠早期小肠长度与重量的增长，增加肠绒毛高度，促进小肠形态发育成熟；产前地塞米松使用可减少新生鼠肠道TLR4的表达。
　　第二部分产前使用地塞米松对坏死性小肠结肠炎新生鼠Toll样受体4表达的影响
　　目的：观察产前地塞米松(dexamethasone，DEX)使用对新生大鼠坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis，NEC)发生率及肠道Toll样受体4(Toll-like receptor 4，TLR4)表达的影响，探讨其对NEC的保护作用及可能的机制。
　　方法：实验分为正常对照组、产前地塞米松干预组(DEX组)、产前生理盐水干预组(normall saline，NS组)三组，于孕16、17、18天时DEX组孕鼠肌肉注射DEX(0.5mg/(kg·d))，NS组注射NS(0.3ml/d)。DEX组及NS组所生新生鼠建立NEC动物模型。正常对照组不予处理。全部新生鼠于第5日处死，取近回盲部肠组织做病理切片，采用HE染色观察病理变化并做评分；免疫组化法检测各组TLR4蛋白的表达；其余小肠部分荧光实时定量PCR法检测TLR4mRNA的表达。
　　结果：与NS组相比，DEX组新生鼠NEC发生率明显降低(P<0.001)。正常对照组未出现NEC症状，NS组新生鼠出现典型的NEC症状，DEX组NEC症状比NS组出现得更晚、更轻；与正常对照组相比，DEX组和NS组肠组织病理学评分及TLR4表达显著增高(P<0.05)；与NS组相比，DEX组肠组织病理学评分及TLR4表达显著降低(P<0.05)。
　　结论：产前使用DEX对NEC大鼠具有保护作用，其机制可能是通过降低TLR4的表达从而发挥抗炎效应。