低频超声治疗口腔溃疡的实验研究

摘要

背景：口腔粘膜病是指发生在口腔黏膜、软组织上的类型各异，种类众多的口腔疾病的总称。口腔溃疡主要发生在口腔黏膜上，是最常见的口腔黏膜病之一。有调查显示，目前国内口腔疾病的发病率占中国人口的74％。其中最常见的口腔疾病有四种：龋病、牙周炎、牙龈炎、溃疡。而口腔溃疡的患病率高达20％左右，居口腔黏膜病的首位，在口腔疾病中仅次于龋病和牙周疾病，位居第三。但是由于口腔溃疡的病因复杂，存在明显的个体差异；同时由于口腔内环境的特殊性，其治疗方法多以通过全身治疗结合局部治疗来延长间歇期、缩短发作期、缓解病情。其中全身治疗由于用药繁琐，服药时间较长，副反应多，患者依从性大等因素而影响其效果；因此局部治疗成为口腔溃疡临床治疗的重要方法。目前局部治疗主要仍然以药物治疗为主，其主要作用是消炎、止痛并促进愈合，但是由于口腔内环境的特殊性，其药物在口内容易被唾液稀释而降低其有效性，基于此我们试图寻找一种新的途径，从而提高其有效性。
　　近年，随着超声生物学效应研究的深入，低频超声治疗受到了国内外学者的广泛关注，由于其设备操作简便、安全性较易控制，常用于促进手术切口的愈合；肌腱损伤、神经损伤、骨折及放射骨坏死的再生或修复等，取得了较好的效果。国外曾有使用低频超声牙刷治疗口腔溃疡的报道，其原理主要是采用头内埋有压电超声波发射器的牙刷发射低强1度超声，在刷牙时，使与之接触的牙龈或口腔黏膜受到超声波刺激，从而达到治疗目的。目前低频超声用于口腔黏膜疾病治疗的报道较少，因此如能改良低频超声治疗仪用于口腔溃疡的治疗，提供局部治疗口腔溃疡的新方法，解决局部药物治疗的局限性。
　　目的：本实验拟通过改良陈谦明法构建口腔溃疡动物模型；通过不同功率低频超声照射，观察溃疡愈合时间、组织病理切片变化；探讨低频超声对口腔溃疡组织中的过氧化物歧化酶(Superoxidedismutase，SOD)活性、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)、一氧化氮(Nitrogen monoxidum，NO)及一氧化氮合酶(Nitricoxide synthase，NOS)含量变化的影响；同时采用免疫组化检测观察和分析表皮细胞生长因子及其受体的变化。
　　材料与方法
　　(1)利用氧自由基诱导法+物理烧伤法建立SD大鼠颊囊黏膜溃疡，肉眼观察24h形成溃疡，并切取标本采用HE染色进行病理切片鉴定。
　　(2)建模成功后用不同功率低频超声照射溃疡面，观察大鼠实验性口腔黏膜溃疡愈合时间，用化学试剂盒检测溃疡组织中一氧化氮(Nitrogen monoxidum，NO)、一氧化氮合酶(Nitricoxide sylathase，NOS)、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量、过氧化物歧化酶(Superoxide dismutase，SOD)活性的影响。
　　(3)将不同组别的标本石蜡包埋，制作病理切片并利用免疫组化技术检测和分析表皮细胞生长因子及其受体的变化。
　　结果
　　(1)改良陈谦明法构建的SD大鼠溃疡模型，病理切片显示其溃疡病理特点与人类口腔溃疡病理特点基本相似。
　　(2)低频超声组较溃疡组及药物组的溃疡愈合时间短，但低频超声各组间无显著差别。低频超声输出功率1.1W、1.58W、2.06W组较溃疡组。NO、NOS、MDA含量显著降低(P<0.05)，SOD升高含量显著(P<0.05)，与正常对照组之间统计学无意义(P>0.05)；
　　(3)。EGF在口腔正常粘膜组织细胞的胞浆中出现阳性表达，在口腔溃疡组织中的阳性表达量有所下降(P<0.05)；EGFR在口腔正常粘膜和溃疡组织中均有表达，但其在正常粘膜中的表达主要表现在基底层细胞胞浆和胞膜上，在溃疡组织中溃疡区域组织细胞阳性表达率较低，因溃疡区域上皮结构消失，溃疡边缘上皮表达率较低；但不同功率低频超声处理组及药物处理组溃疡区域组织中EGF、EGFR的阳性表达率均比溃疡组组织中阳性表达率高(P<0.05)，但与正常组无明显差异(P>0.05)。
　　结论
　　(1)利用改良陈谦明法可成功构建口腔溃疡动物模型。
　　(2)实验结果表明：不同功率超声(1.1W、1.58W、2.06W)处理溃疡面后，其溃疡愈合期提前；不同功率间无明显差异；与药物组间亦无明显差别。结果证实，低频超声可能对口腔溃疡的愈合有一定作用。
　　(3)实验结果显示：不同功率超声(1.1W、1.58W、2.06W)处理大鼠溃疡面后，其溃疡组织中NO、NOS及MDA含量降低，SOD含量升高，恢复至近正常粘膜水平，说明功率为1.1W-2.06W的低频超声可能对溃疡的愈合起到促进作用。