包裹阿霉素新型载药微泡制备及靶向治疗肿瘤实验研究

摘要

第一部分包裹阿霉素新型载药微泡制备及体外缓实验研究
　　目的: 将包裹阿霉素(ADM)的乳\羟基乙酸共聚物(PLGA)缓释微球(ADM-PLGA)与带正电的超声脂质微泡(MB-NH2)表面的氨基通过共价结合方式相连接，制备包裹ADM的新型载药微泡，并检测其基本理化特性、载药量、包封率、体外缓释特性及显影效果。
　　方法: 采用双乳化法，制备ADM-PLGA，用碳二亚胺法活化ADM-PLGA表面的羧基，在一定条件下，使ADM-PLGA以共价结合的方式，连接于MB-NH2表面。观察连接情况、微泡形态并检测其粒径大小。用高效液相色谱法（HPLC）检测其包封率及载药量，观察该新型载药微泡的体外缓释药特性以及对兔肝VX2肿瘤的显像效果。
　　结果: 48 h后置于光镜下观察，可见ADM-PLGA微球连接于MB-NH2表面，呈花环状，分布较为均匀，其平均粒径为（2.68±0.98）μm。用HPLC测的该新型载药微泡的载药量为（8.71±0.46）％，包封率为(86.11±6.76)％。辐照组与非辐照组的体外释药均符合Hignch方程，其结果无明显差异性(P＜0.05)，该新型载药微泡48 h体外累积释药量达到90％以上。经兔耳缘静脉注射后，兔肝实质明显持续增强，VX2肿瘤呈“快进快退”表现。
　　结论: 通过共价结合的方式将ADM-PLGA连接于MB-NH2表面，能够提高微泡载药量，延长药物的作用时间，并且在兔肝VX2肿瘤中显影效果良好，为采用超声靶向爆破微泡进行药物定位释放技术，提供了一种新型高效的理想载药微泡系统。
　　第二部分新型载阿霉素微泡联合超声靶向爆破技术治疗兔肝VX2肿瘤实验研究
　　目的: 观察聚包裹阿霉素的新型载药微泡联合UTMD靶向治疗兔肝VX2肿瘤的效果。
　　方法: 制备裹阿霉素的新型载药微泡。将30只新西兰大白兔肝VX2移植瘤模型随机分为3组，每组10只。A组为ADM-PLGA辐照组，经耳缘静脉注入5 ml的ADM-PLGA;B组为混合辐照组，经耳缘静脉注入同等剂量的混合溶液（ADM-PLGA+MB-NH2）;C组为新型微泡辐照组(ADM-PLGA-MB-NH2):经耳缘静脉注入相同剂量的新型微泡。3组在注射药物的同时，均采用频率为1 MHz、声强为0.5W/cm2的超声波经皮辐照肿瘤120 s。末次治疗24 h后处死荷瘤兔，固定标本，送检行PCNA和TUNEL检测。比较各组的肿瘤生长率、免疫组化法检测VX2肿瘤增殖细胞核抗原(PCNA)表达，用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测VX2肿瘤细胞的凋亡情况，并计算增值指数(PI)与凋亡指数(AI)。
　　结果: A、B、C组肿瘤的生长率分别为（80.13±4.34）％，（59.66±7.93）％及（50.47±9.69）％，C组肿瘤生长率与A、B组的差异有统计学意义（P＜0.05）。A、B、C组肿瘤增值指数分别为(74.82±7.25)％、（60.77±8.48)％及（55.94±6.97)％,C组与A、B组的差异均有统计学意义(P＜0.05)。A、B、C组凋亡指数分别为（31.7±6.42）％，（50.35±3.82）％及（72.47±5.93）％，C组凋亡指数与A、B两组的差异有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论: 采用包裹ADM的新型载药微泡联合UTMD治疗兔肝VX2肿瘤，可显著提高疗效，延缓肿瘤细胞增殖，促进其凋亡，为肿瘤的靶向治疗提供了一种新方法。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

摘要

前言

参考文献

第一部分 新型载药微泡的制备及体外缓释实验研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

附图

第二部分 新型载药微泡联合超声靶向爆破技术治疗兔肝VX2肿瘤实验研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

附图

全文总结

综述 PLGA纳米粒在肿瘤靶向治疗中的应用

致谢

攻读学位期间发表的学术论文、参研项目及学士交流情况