胸腺素β4壳聚糖纳米粒纤维蛋白胶胶联羊膜的制备及其对NF-κB表达调节治疗兔角膜创伤

摘要

目的:制备一种新型生物复合材料，胸腺素β4/壳聚糖纳米粒胶联羊膜(Tβ4/CS-FBAM)，它具有双重缓释功能。研究其体外性能，通过兔角膜创伤模型，研究胸腺素β4/壳聚糖纳米粒胶联羊膜修复角膜的作用及对角膜中核转录因子NF-κB表达的调节作用，初步探讨复合材料的作用机制。
　　方法:本实验分为四个步骤:
　　一、采用离子交联法制备胸腺素β4/壳聚糖纳米粒，考察其粒径，zeta电位，包封率等理化特征。
　　二、胸腺素β4/壳聚糖纳米粒混悬液滴眼液的兔眼表毒性试验。考察其眼表毒性，检测其作用于眼表的安全性。
　　三、制备胸腺素β4/壳聚糖纳米粒胶联羊膜(Tβ4/CS-FBAM)，考察胸腺素β4/壳聚糖纳米粒和胸腺素β4/壳聚糖纳米粒胶联羊膜释放胸腺素β4/的性能。
　　四、制作兔角膜创伤模型，实时荧光定量PCR方法检测胸腺素β4/壳聚糖纳米粒胶联羊膜对术后兔角膜中NF-κB的调控作用探讨其修复角膜的机制。
　　结果:
　　一、胸腺素β4/壳聚糖纳米粒形状规则，呈球形，表面较为光滑，大小均匀一致。胸腺素β4/壳聚糖纳米粒的体系稳定，粒径是354±1.6nm，包封率是(76.15±2.80)％，zeta电位是22.5±0.7mv，有缓释胸腺素β4的功能。
　　二、胸腺素β4/壳聚糖纳米粒混悬液滴眼液无眼表毒性，不改变兔结膜，角膜，眼睑的外观及组织结构。
　　三、胸腺素β4/壳聚糖纳米粒交联羊膜不易卷曲，载有纳米粒的纤维蛋白胶呈网状。在体外胸腺素β4/壳聚糖纳米粒交联羊膜可缓释胸腺素β4，可持续14天。
　　四、在兔角膜创伤模型中，术后胸腺素β4/壳聚糖纳米粒胶联羊膜组，单纯胶联羊膜组，胸腺素β4/壳聚糖纳米粒混悬液滴眼液组能有效降低角膜NF-κB表达，减少炎症反应，各时间点的差异具有统计学意义(P＜0.05)。
　　结论:制备的Tβ4/CS-FBAM作为一种新型生物移植材料可在局部缓慢释放胸腺素β4，通过下调兔创伤角膜中的NF-κB的表达促进角膜修复。

目录

声明

符号说明

摘要

前言

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.2 Tβ4／CS纳米粒的制备及表征

1.3 眼表毒性测定

1.4 胸腺素β4／壳聚糖纳米粒胶联羊膜(Tβ4／CS-FBAM)的制备，形态学观察，释药及FBAM制备

1.5 角膜创伤动物模型的建立，手术方法及用药

1.6 角膜大体观察及组织病理学观察

1.7 统计学分析

2 结果

2.1 Tβ4／CS纳米粒的表征分析结果

2.2 Tβ4／CS纳米粒和Tβ4／CS-FBAM的释药曲线

2.3 眼表毒性

2.4 Tβ4／CS-FBAM形态学观察

2.5 角膜大体观察及组织病理学观察

2.6 NF-κB mRNA的表达

3 讨论

全文结论

参考文献

文献综述 HIV／AIDS并发的眼表疾病及其治疗

致谢

攻读硕士学位期间发表的文章