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不同灌注方法取得的肝细胞脾内移植治疗急性肝损伤小鼠疗效的研究

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前言

第一部分 肝细胞分离

1 材料和方法

2 结果

3 讨论

结论

第二部分 不同灌注方法取得的肝细胞脾内移植治疗急性肝损伤小鼠疗效的研究

1材料和方法

2 结果

3 讨论

结论

存在问题及展望

参考文献

文献综述: 肝细胞移植

致谢

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摘要

目的:探讨经门静脉、下腔静脉灌注对提取小鼠肝细胞产率、纯度、存活率的影响,并比较两种灌注方法所得肝细胞脾内移植治疗急性肝损伤(AcuteLiverInjury,ALI)小鼠的疗效。
  方法:采用两步法分别经门静脉与下腔静脉灌注分离小鼠肝细胞,30只小鼠切除部分肝脏建立ALI模型,随机分为A、B、C三组,每组10只,分别脾内注射经门静脉灌注获得的肝细胞悬液0.5ml、经下腔静脉灌注获得的肝细胞悬液0.5ml及对照组Hank’s液0.5ml,移植后第10天观察各组小鼠肝功能、脾内肝细胞分布及脾内白蛋白合成变化情况。
  结果:门静脉途径灌注法所得肝细胞的产率、纯度、存活率优于下腔静脉途径灌注分离的肝细胞(p<0.05)。移植第10天,与对照组比较,A、B两组都能明显改善ALI小鼠的肝功能(p<0.05),脾脏HE染色肝细胞散在分布,脾脏共聚焦白蛋白免疫荧光染色有大量绿色荧光信号,A组强于B组。
  结论:门静脉途径灌注法所得肝细胞的产率、纯度、存活率优于下腔静脉途径灌注分离的肝细胞;门静脉灌注所得肝细胞脾移植治疗ALI疗效优于下腔静脉灌注。

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