TRP通道在人脑微血管内皮细胞机械牵张中的作用及其信号转导机制研究

摘要

目的:观察瞬时感受器电位(TRP)通道在人脑微血管内皮细胞(HBMEC)机械牵张刺激中的作用，并对其信号传导入胞内的机制进行初步探讨。
　　方法:HBMEC体外培养，采用多功能小型生物撞击机给予机械牵张刺激，根据不同施加条件将细胞分为对照组、单纯牵张组、牵张+SKF-96365（非选择性TRP通道阻滞剂）组、牵张+低分子量肝素(LMWH)组、牵张+一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)组共五组。采用激光扫描共聚焦显微镜观察胞内游离Ca2+荧光分布情况，流式细胞仪检测牵张前后胞内Ca2+相对荧光强度变化;Western blot检测牵张前后一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达情况。
　　结果:流式细胞仪检测结果显示，与对照组(73.15±8.20)和牵张+SKF-96365组(79.12±8.98)胞内Ca2+浓度相比较，单纯牵张组(103.86±7.05)胞内Ca2+浓度明显升高（P＜0.05）;Western blot检测结果显示，与对照组(35.62±4.38％)、牵张+SKF-96365组(36.38±4.21％)和牵张+L-NAME组(34.25±4.83％)相比较，单纯牵张组一氧化氮合酶(43.13±3.20％)(eNOS)蛋白表达水平明显升高(P＜0.05)。
　　结论:机械牵张刺激能提高HBMEC胞内游离Ca2+浓度和eNOS蛋白表达量，其机制可能与TRP通道的激活、胞外Ca2+内流相关。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

摘要

前言

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 实验方法

1．3 统计学处理分析

2 结果

2．1 HBMEC细胞株的鉴定

2．2 机械牵张刺激对HBMEC细胞活性的影响

2．3 激光扫描共聚焦显微镜检测细胞胞内Ca2+荧光强度

2．4 流式细胞仪检测细胞胞内Ca2+相对荧光强度

3 讨论

结论

参考文献

文献综述 机械敏感性TRP通道在血管系统中的研究进展

致谢

攻读硕士学位期间发表文章