多克隆及单克隆P24抗体在石蜡组织切片上检测BDV-P24蛋白质的应用

摘要

研究目的:
　　验证本课题组前期制备的多克隆及单克隆P24抗体能否在石蜡组织切片上检测博尔纳病病毒(Borna disease virus，BDV)磷蛋白(P24蛋白质)以及探索其运用的条件。
　　研究方法:
　　选择出生24h内的SD大鼠20只为实验组颅内注射BDV病毒液，对照组大鼠20只在相同部位注射磷酸盐缓冲液(Phosphate BufferedSaline，PBS)，未经注射的SD大鼠和C57小鼠各40只作为阴性实验对照，饲养到60天取脑石蜡包埋制片;免疫组化染色用Envision两步法，一抗为多克隆或单克隆P24抗体，以PBS代替一抗作为空白对照，P24抗体的稀释浓度分别从1∶50、1∶100、1∶200、1∶400、直到1∶5000;以高倍镜下神经细胞细胞质呈棕黄色或棕褐色颗粒为阳性，将每张切片阳性细胞比例评分乘以阳性强度评分计算总分。
　　结果:
　　多克隆P24和单克隆P24抗体分别在BDV感染大鼠实验组与阴性对照组的染色评分差异有统计学意义（多克隆抗体Z=-3.108，P=0.000，而单克隆抗体Z=-4.605，p=0.000）;在多克隆P24抗体稀释度中，1∶200、1∶400的敏感性好而背景着色较轻，在单克隆P24抗体稀释度中，1∶100、1∶200、1∶400的敏感性好而无背景着色。
　　结论:
　　多克隆及单克隆P24抗体在石蜡组织切片上能检测出BDV P24蛋白质;并且多克隆P24抗体推荐的浓度为1∶200和1∶400，单克隆P24抗体的推荐浓度为1∶100、1∶200和1∶400。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

摘要

前言

1 材料与方法

1．1 BDV病毒株

1．2 BDV感染大鼠

1．3 病理组织切片的制备、免疫组化染色分组及阳性判断标准

1．4 统计分析

2 结果

2．1 多克隆P24抗体免疫组化结果及统计分析

2．2 单克隆P24抗体免疫组化结果及统计分析

3 讨论

参考文献

文献综述 博尔纳病病毒与人类神经精神疾病

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术论文