白血病抑制因子在Vogt-小柳原田综合征及Behcet病中潜在抗炎特性的研究

摘要

目的:以往的研究中发现，白血病抑制因子是一种多效性的细胞因子。它在维持胚胎干细胞的再生及多能性、营养神经等过程中起了重要作用。它同时也具有促进炎症和抑制炎症的特性。然而白血病抑制因子对用antiCD3/CD28抗体刺激后的CD4+T细胞的直接作用以及是否白血病因子在Vogt-小柳原田综合征及Behcet病病程中发挥作用尚未有报道。本实验通过研究上述两个方面，以期能更深入了解白血病抑制因子对CD4+T细胞的作用，同时为进一步了解葡萄膜炎、预防及治疗葡萄膜炎寻找到新的靶点和突破口。
　　方法:使用流式细胞术及细胞增殖分析法检测重组人白血病抑制因子对CD4+T细胞激活后活化、增殖、凋亡、扩增影响;使用荧光定量PCR技术检测转录因子T-bet，RORγt，和Foxp3的表达;使用流式细胞术评价MAPK信号通路的磷酸化。使用荧光定量PCR技术及酶联免疫吸附试验检测Vogt-小柳原田综合征(VKH)患者、Behcet病(BD)患者、正常人外周血单个核细胞及血清白血病抑制因子的表达。使用酶联免疫吸附试验检测血清sgp130及培养上清液细胞因子的表达。
　　结果:白血病抑制因子能够明显抑制用抗CD3/CD28抗体刺激后的Th17细胞和IL17+IFN-γ+细胞扩增，使IL-17的分泌水平明显减少，明显削弱转录因子RORγt的表达水平。在刺激15分钟时，白血病抑制因子能促进ERK1/2信号通路短暂的磷酸化。与健康对照相比，活动期VKH病人和活动期BD病人外周血单个核细胞LIF mRNA的表达显著降低。静止期患者LIF mRNA的表达量介于相应活动期患者和正常对照之间。38个活动期葡萄膜炎患者中仅有10个患者血清中能够检测到LIF蛋白的浓度，28个非活动期葡萄膜炎患者有12个，15个正常对照中有7个能够检测LIF蛋白的表达。用重组人白血病抑制因子处理活动期葡萄膜炎病人的CD4+T细胞后，IL-17的分泌明显减少。
　　结论:白血病抑制因子能够影响受刺激的CD4+T细胞的应答过程，因而可能在CD4+T细胞介导的疾病（如Vogt-小柳原田综合征、Behcet病）的病理过程中发挥作用。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

摘要

前言

第一部分 白血病抑制因子对病理性CD4+T细胞(抗antiCD3／CD28刺激)作用的研究

第一节 白血病抑制因子对病理性CD4+T细胞活化、增殖、扩增、凋亡及分泌特征性细胞因子的影响

1 材料和方法

2 结果

3 讨论

第二节 白血病抑制因子作用于病理性CD4+T细胞的信号通路

1 材料的方法

2 结果

3 讨论

第二部分 白血病抑制因子在Vogt-小柳原田综合征及Behoet病中作用的研究

第一节 白血病抑制因子在Vogt-小柳原田综合征及Behcet病患者中的表达水平

1 材料和方法

2 结果

3 讨论

第二节 白血病抑制因子对Vogt-小柳原田综合征及Behcet病患者分泌细胞因子IFN-γ，IL-17，IL-10的影响

1 材料和方法

2 结果

3 讨论

第三节 Vogt-小柳原田综合征患者、Behcet病患者及正常人血清中溶解性gp130(sgp130)的检测

1 材料和方法

2 结果

3 讨论

全文总结

参考文献

文献综述 白血病抑制因子参与免疫耐受、抑制炎性反应的研究进展

致谢

攻读硕士期间完成的文章