复元胶囊调控JNK信号通路保护骨关节炎软骨细胞的实验研究

摘要

目的：
　　研究复元胶囊对 OA软骨细胞凋亡、细胞外基质降解的保护作用及可能涉及的机制。
　　方法：
　　体外培养人软骨肉瘤细胞（ SW1353），给予白细胞介素-1β（interleukin-1 beta,IL-1β）刺激，复元胶囊含药血清和c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase, JNK）特异性抑制剂（SP600125）干预，随机分为正常组、模型组、抑制剂组、复元胶囊组、复元胶囊+抑制剂组，分别采用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率，CCK-8检测细胞增殖活性，实时荧光定量核酸扩增检测系统（Real-time Quantitative PCR Detecting System, Q-PCR）检测基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)3、13 mRNA的表达，蛋白质印迹法（Western Blot）检测细胞信号因子磷酸化 c-Jun氨基末端活化蛋白激酶(p-JNK)和Bax的蛋白表达。
　　结果：
　　模型组与正常组比较，前者 G0/G1期的百分率增加，S期及 G2/M期的百分率减少，细胞增殖指数（PI）减少；细胞凋亡率显著增高；细胞增殖活性降低；MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著增高；p-JNK和 Bax蛋白表达均明显增加（P<0.01）。干预组与模型组比较，前者PI增加；细胞凋亡率显著降低；细胞增殖活性增加；MMP-3、MMP-13 mRNA表达显著降低；p-JNK和 Bax的蛋白表达均减少（P<0.01或P<0.05）；其中复元胶囊+抑制剂组的各项指标变化最明显（与模型组比较P<0.01）。
　　结论：
　　复元胶囊可抑制 OA软骨细胞的凋亡并促进增殖；抑制细胞外基质的降解；复元胶囊防治骨关节炎的作用强于单一的JNK特异性抑制剂；其作用机制可能与抑制JNK信号通路有关。

目录

封面

目录

英汉缩略语名词对照

中文摘要

英文摘要

前言

1材料与方法

1.1实验材料

1.2 实验方法

2 结果

2.1 复元胶囊对IL-1β诱导的SW1353细胞周期的影响

2.2 复元胶囊对IL-1β诱导的SW1353细胞凋亡的影响

2.3 复元胶囊对IL-1β诱导的SW1353细胞增殖活性的影响

2.4 复元胶囊对IL-1β诱导的SW1353细胞MMP-3、MMP-13mRNA表达的影响

2.5 复元胶囊对IL-1β诱导的SW1353细胞信号因子p-JNK和Bax蛋白表达的影响

3 讨论

3.1 软骨细胞过度凋亡与OA的发病密切相关

3.2 OA发病的中心环节是细胞外基质合成与降解的不平衡

3.3 JNK信号通路及其特异性抑制剂与OA

3.4 中药防治研究与OA

全文总结

创新点及意义

思考与展望

参考文献

附图1

附图2

附图3

文献综述: 关于骨关节炎的分子机制研究

致谢

攻读硕士期间发表的论文