HPV16E6、p53和TLR1在口腔癌中的表达研究

摘要

目的：①探究HPV16E6蛋白和抑癌基因p53在口腔癌细胞中的表达。②研究TLR1在舌鳞癌及癌旁组织中的分布与表达，探索TLR1在舌鳞癌发病机制中所起的作用。
　　方法：⑴用免疫组织化学方法检测149例口腔癌、88例口腔癌癌前病变和49例癌旁组织标本中HPVl6E6蛋白和p53蛋白的阳性表达率以及口腔癌不同临床分期、病理分级的HPV16E6和p53的阳性表达率。⑵通过RT-PCR和 WB，测定60名舌鳞癌患者实验样本的TLR1的mRNA和蛋白质表达水平。采用免疫组化和免疫荧光，研究 TLR1在舌鳞癌及癌旁组织中的分布特征。
　　结果：①口腔癌组织、口腔癌癌前病变组织和口腔癌旁组织中HPV16E6蛋白的阳性表达率分别为79.9％(119/149)、38.6%(34/88)和2.0%(1/49)，p53蛋白的阳性表达率分别为24.2%(36/149)、55.7%(49/88)和92.0%(45/49)；口腔癌组织、口腔癌癌前病变组织与癌旁组织相比，癌变组织的HPV16E6阳性表达率明显升高，而p53阳性表达率显著降低(P<0.05)。临床分期Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期的口腔癌组织与Ⅰ期相比，HPV16E6阳性表达率明显增加，而p53阳性表达率却明显减少（P<0.05）。病理分级Ⅱ、Ⅲ级的口腔癌组织与Ⅰ级相比，HPV16E6阳性表达率明显增加，而p53阳性表达率明显减少(P<0.05)。②RT-PCR和WB的分析结果显示，TLR1在舌鳞癌样本中的表达，较在相匹配的癌旁组织中的表达下调(P<0.01)。TLR1的表达水平与临床参数，如肿瘤侵袭深度、存活率等密切相关。免疫组化的结果显示，TLR1主要表达于舌正常鳞状细胞、及导管血管内皮细胞中；弱表达于舌鳞癌细胞中。免疫荧光染色结果，进一步揭示 TLR1与血管内皮细胞标记物 CD31共表达，但不与血管平滑肌细胞标记物α-SAM共表达。
　　结论：⑴口腔癌细胞中HPV16E6阳性表达率升高和p53阳性表达率下降可能与口腔癌的发生和发展有关。⑵TLR1的高表达在舌鳞癌组织中明显降低，与舌鳞癌的临床进展密切相关，揭示TLR1在舌鳞癌的发生发展中起一定作用，且可能成为舌癌临床判断中重要的预测因子。

目录

封面

声明

目录

英汉缩略语名词对照

中文摘要

英文摘要

前言

第一部分 HPV16E6和p53在人口腔癌中的表达研究

1 材料和方法

1.1 一般资料

1.2 主要仪器与试剂

1.3 免疫组织化学方法（ DAB 染色法）

1.4 阳性表达率的判定标准

1.5 统计学处理

2 结果

2.1 年龄和性别因素对口腔癌病人 HPV16E6 和 p53 蛋白阳性表达的影响

2.2 口腔癌组织中 HPV16E6 和 p53 的表达

2.3 不同口腔病变组织中 HPV16E6 和 p53的阳性表达率的比较

2.4 口腔癌临床分期与 HPV16E6 和 p53阳性表达率的比较

2.5 口腔癌病理分级与 HPV16E6 和 p53阳性表达率的比较

3 讨论

4 结 论

第二部分 TLR1在舌鳞癌及癌旁组织中的表达

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.2 主要试剂与耗材

1.3 实验方法

2 结果

2.1 舌癌组织及癌旁组织的形态学分析

2.2 TLR1 的 mRNA和蛋白表达在人舌鳞癌组织中明显下调

2.3TLR1 的表达和临床病理的相关性

2.4 TLR1 在癌组织和癌旁组织中的表达

3.讨论

4.结论

全文总结

研究方法和目的

研究结果

参考文献

文献综述:HPV家族及其致癌作用

致谢

硕士研究生期间发表论文