大鼠脊髓压迫性损伤解压后pEGFR的表达变化

摘要

研究发现，脊髓压迫性损伤（Compressed Spinal Cord Injury，CSCI）后，髓鞘丢失的主要原因是少突胶质细胞的凋亡。资料显示，pEGFR可促进少突胶质细胞的增殖和分化，并可抑制少突胶质细胞的凋亡，提示EGFR活化可能对髓鞘有保护作用。然而在CSCI解压后，pEGFR的表达变化仍未见报导。
　　目的：
　　探讨大鼠脊髓压迫性损伤（compressed spinal cord injury，CSCI）解压后表皮生长因子受体（phosphorylated epidermal growth factor receptor，pEGFR）、pAkt1的表达变化及其与神经功能、有髓神经纤维数量变化的相关性，为CSCI解压后治疗策略的制定和药物的研发提供实验基础。
　　方法：
　　采用自行设计的方法制作SD大鼠CSCI模型，造模成功后解压。运用BBB（Basso Beattie Bresnahan）评分观察动物解压后神经功能的恢复情况；通过Luxol fast blue（LFB）染色检测解压后1、7、14、21d有髓神经纤维数量变化；运用免疫荧光双标（Double-labeling immunoflurescence）、免疫印迹（western blotting，WB）检测pEGFR、 pAkt1的表达变化。
　　结果：
　　CSCI解压后，BBB评分和有髓神经纤维数量随时间延长而逐渐增加；与此同时，pEGFR、pAkt1表达亦上调且与BBB评分、有髓神经纤维数量增加趋势一致。
　　结论：
　　CSCI解压后，神经功能有一定改善、有髓神经纤维数量有一定增加，这些变化与pEGFR表达上调有关，提示EGFR的活化参与了CSCI解压后的内源性修复。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

实验一 CSCI解压后，BBB评分、有髓神经纤维计数

1 材料

1.1 实验动物

1.2 实验仪器、药品和试剂

2 方法

2.1 实验动物分组

2.2 动物模型制作

2.3 Basso Beattie Bresnahan（BBB）评分

2.4有髓神经纤维髓鞘染色及计数

2.5 统计学分析

3 结果

3.1 BBB评分

3.2 LFB染色

实验二 CSCI解压后，pEGFR、pAkt1的表达变化

1 材料

1.1 实验动物

1.2 实验仪器、试剂和药品

2 方法

2.1 实验动物分组

2.2 动物模型制作

2.3 冰冻切片制作

2.4 NG2与pEGFR、pAkt1荧光双标

2.5 Western blot检测pEGFR、pAkt1表达水平

2.6 统计学方法

3 结果

3.1 免疫荧光双标结果

3.2 免疫印迹结果

讨论

参考文献

全文总结

附图

文献综述:表皮生长因子受体在少突胶质细胞发育过程中作用的研究进展

致谢

攻读硕士期间发表的论文