盐补骨脂一测多评法的建立及其在炮制工艺优选与质量评价中的应用研究

摘要

本文建立了一种超高效液相色谱（ultra-high performance liquid chromatography,UHPLC）技术结合一测多评法（quantitative analysis of multi-components by single marker,QAMS）同时测定补骨脂中9种主要成分（异补骨脂素、补骨脂素、补骨脂定、补骨脂宁、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂乙素、补骨脂查耳酮以及补骨脂酚）含量的方法。并以此为手段，结合D-最优设计响应面分析，优选了补骨脂药材盐炙工艺参数，建立了参数明确、过程可控的盐补骨脂炮制工艺。在优选的炮制工艺基础上，通过对14批补骨脂药材的优化炮制和QAMS含量测定，对盐炙饮片进行质量评价。为提高盐补骨脂质量均一性和临床安全性提供技术支持。
　　目的：
　　建立同时测定补骨脂中多指标成分含量测定法；优化盐补骨脂饮片炮制工艺；并对优化的盐补骨脂饮片进行质量评价。
　　方法：
　　1.QAMS法和外标法（External standard method,ES）色谱条件：色谱柱为C18 ODS色谱柱（50 mm×2.0 mm,1.6μm）；检测波长246 nm；柱温45℃；进样量4μL；以乙腈-0.2%冰醋酸水溶液为流动相，0.4 mL/min体积流量，梯度洗脱。以异补骨脂素为内参物，确定其与其他8个成分的相对校正因子（relative correction factor,RCF）值和相对保留时间值（relative retention time,r）。用Wilcoxon配对秩和检验比较QAMS法和ES法测定14批药材含量结果的差异来验证QAMS法。
　　2.以盐补骨脂炮制工艺关键参数（炒制温度、闷润时间及加盐量）为自变量，进行D-最优设计；以QAMS含测获得的补骨脂中9种主要成分炮制前后质量变化分数为因变量，进行响应面分析；结合单因素分析确定炒制时间，优化出补骨脂盐炙工艺。
　　3.运用优化炮制工艺制备14批盐补骨脂饮片，并运用QAMS法对其进行质量评价。
　　结果：
　　1.Wilcoxon配对秩和检验结果（r≥0.9975，p＜0.01）表明QAMS法所得结果和参比方法（ES法）所得实测值无显著差异，QAMS法可代替ES法对补骨脂进行多成分含量测定。
　　2.盐补骨脂的最佳炮制工艺为：在100 g补骨脂药材中加入2.10 g盐，闷润12 h，在80℃炒制30 min。
　　3.得到14批优化盐补骨脂饮片，对其进行QAMS含测，结果盐炙后补骨脂中香豆素类含量平均升高了98.34%，黄酮类含量平均升高了65.95%，单萜酚类含量平均升高了16.48%。
　　结论：
　　本文所建立的QAMS法能替代ES法对补骨脂进行多成分含量测定；QAMS法与D-最优设计结合，优选出了盐补骨脂炮制工艺，提高了工艺稳定性及重复性，为补骨脂盐炙工艺提供了数据支撑；同时运用QAMS法对盐补骨脂饮片进行质量评价，可在补骨脂及其盐炙饮片市场流通的各个环节对其进行质量控制，从而保证临床应用中的疗效和安全性。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1. 盐补骨脂炮制工艺现状

2.补骨脂及盐炙品质量评价现状

3. 一测多评在中药质量评价中的应用现状

4. 本文研究目的及内容

第一章 补骨脂外标法含量测定

第一节 补骨脂药材样品的收集

第二节 外标法多成分含量测定的建立

第三节 本章小结

第二章 补骨脂一测多评法含量测定

第一节 一测多评含测法的建立

第二节 样品含量测定

第三节 本章小结

第三章 盐补骨脂炮制工艺优化

第一节 D-最优设计

第二节 响应面分析

第三节 本章小结

第四章 盐补骨脂饮片的质量评价

第一节 盐补骨脂饮片的制备

第二节 盐补骨脂饮片的含量测定

第三节 本章小结

全文总结

参考文献

文献综述:盐补骨脂的炮制及质量评价研究概述

致谢

硕士期间的科研成果