氟西汀对老年APP/PS1小鼠脑内胆碱能神经递质及基底前脑内胆碱能神经元作用的研究

摘要

目的：
　　研究发现抗抑郁药氟西汀可以有效地抑制阿尔兹海默病(AD)患者病情的发展，并且能明显改善AD患者大脑的认知和记忆功能，但其作用机制仍不清楚。因此，本实验以期探讨胆碱能神经系统是否是氟西汀改善AD大脑空间学习记忆能力的作用靶点之一。
　　方法：
　　随机选取18月龄的雄性APP/PS1小鼠40只随机分为阳性对照组(APP/PS1组)(n=20)和氟西汀组(FLX组)(n=20)，分别给予腹腔注射生理盐水(0.1 ml/kg)和氟西汀(10 mg/kg)，为期4周，并随机选取18月龄同窝生野生型(wild type,WT)小鼠20只作为阴性对照组(WT组)，该组不给于药物干预。运用Morris水迷宫实验对三组小鼠的空间学习记忆能力进行检测，从每组小鼠中随机选取6只进行灌注取脑，剩余的小鼠直接断颈取脑分离海马及皮质。采用免疫组织化学染色和紫外分光光度法对三组小鼠大脑内β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein，Aβ)沉积情况和乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)的含量、乙酰胆碱脂酶(acetylcholinesterase,AchE)及胆碱乙酰化酶(choline acetyl transferase,ChAT)活性等进行检测；采用免疫组织化学染色方法对基底前脑内胆碱能神经元进行染色，最后运用现代体视学方法对三组小鼠基底前脑内胆碱能神经元的数量进行计数。
　　结果：
　　水迷宫实验显示，APP/PS1小鼠逃避潜伏期显著长于WT小鼠，FLX处理可明显缩短APP/PS1小鼠逃避潜伏期；Aβ免疫组织化学染色显示，WT小鼠脑内未见明显的Aβ沉积，而APP/PS1小鼠脑内可见大量Aβ沉积，FLX处理可明显减少APP/PS1小鼠脑内Aβ沉积；对Ach含量、AchE和ChAT活性检测显示，APP/PS1小鼠大脑皮质及海马内的Ach含量、AchE活性及皮质内的ChAT活性均较WT小鼠降低，FLX处理可明显抑制APP/PS1小鼠大脑皮质及海马内Ach含量、AchE活性的降低，但对ChAT活性没明显的作用；体视学计数结果显示APP/PS1小鼠基底前脑内胆碱能神经元的数量较WT小鼠显著性降低，而FLX组小鼠基底前脑内的胆碱能神经元数量和APP/PS1组小鼠无显著性差异，但较WT小鼠都显著性降低。
　　结论：
　　FLX可以提高18月龄APP/PS1小鼠的空间学习能力，降低大脑内Aβ的沉积，增加大脑海马及皮质内Ach的含量和AchE的活性，但对基底前脑胆碱能神经元的数量没有显著性的作用。因此我们猜测胆碱能系统可能是FLX作用于AD大脑的作用靶点之一，即FLX可能通过增加AD大脑胆碱能神经系统的神经功能活性，进而增加Ach的含量，从而改善AD大脑的空间学习记忆能力。

目录

声明

符号说明

前言

1 材料和方法

1.1实验材料

1.2 药物干预

1.3 Morris 水迷宫

1.4 动物处理

1.5 冰冻切片的制备

1.6 Aβ染色

1.7 胆碱能神经递质的检测

1.8 胆碱能神经元的观察和计数

2统计

3.1 体质量

3.2 Morris 水迷宫

3.3 Aβ老年斑染色结果

3.4 皮质及海马内Ach含量、AchE及ChAT活性的检测

3.5 胆碱能神经元观察及计数

讨论

参考文献

文献综述:氟西汀：治疗阿尔兹海默病的新希望

致谢

攻读硕士学位期间发表及联合发表的学术论文