应用Real-time PCR研究氟保护漆对儿童唾液变形链球菌影响的定量分析

摘要

目的：
　　应用实时荧光定量PCR来研究新型氟保护漆对儿童唾液中变形链球菌数量的变化，从微生态角度来探讨其防龋效果。
　　方法：
　　随机选取某幼儿园26名适龄儿童，平均年龄为5岁，按龋失补牙面数（dmfs），分为有龋组(dmfs≥1)和无龋组(dmfs=0)各13名。按涂氟操作标准对两组分别进行氟保护漆即多乐氟（Duraphat?）的涂布，并收集涂氟前及涂氟后第1小时、第1周、第2周、第3周、第4周、第8周、第12周的唾液，用细菌基因组DNA提取试剂盒（离心柱法）提取唾液中革兰氏阳性菌基因组DNA和标准菌株变形链球菌基因组DNA，通过实时荧光定量PCR（绝对定量）检测各时间节点变形链球菌的数量，使用中位数表示变形链球菌菌落计数。用统计软件SPSS17.0进行数据处理，采用Mann-Whitney U检验比较有龋组与无龋组涂氟前变链数量的差异，以及涂氟后两组各时间节点变链数量的差异与变化，以P＜0.05表明差异具有统计学意义，并对其变化趋势进行分析。
　　结果：
　　未采取涂氟措施前，两组唾液中的变形链球菌数量存在统计学差异（P＜0.05）。有龋组涂氟后变形链球菌数量与涂氟前相比呈明显下降趋势，且在第8周和12周有统计学意义（P＜0.05）；无龋组在涂氟前后变形链球菌数量无明显变化（P＞0.05）。
　　结论：
　　多乐氟能显著降低有龋儿童唾液中变形链球菌的数量，且抑菌效果持续时间较长，对龋易感儿童的防龋效果好，适合作为儿童防龋措施进行推广。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1 材料与方法

1.1 实验材料、试剂和仪器

1.2 研究对象及分组

1.3 实验方法

1.4 统计学分析

2 结 果

2.1 基本情况

2.2 菌落计数（CFU）

2.3 标准曲线

2.4 扩增特异性

2.5 涂氟前后唾液中变形链球菌的数量及变化趋势

3 讨 论

3.1 荧光定量PCR技术可提高检测的灵敏性

3.2 有龋组和无龋组唾液中变形链球菌水平的差异

3.3 氟保护漆对儿童唾液中变形链球菌数量变化的影响

全文总结

参考文献

附图

文献综述：氟保护漆防龋的研究进展

致谢

硕士期间发表论文