Adipolin/CTRP12对LPS致ARDS小鼠的保护作用及肺泡上皮钠离子通道的调节

摘要

目的：
　　探讨Adipolin/CTRP12对LPS致ARDS小鼠的作用以及钠离子通道（ENaC）的调节。
　　方法：
　　40只C57BL/6J小鼠按随机数字表分为对照组、LPS组、Adipolin组和Wortmannin（PI3K抑制剂）组，每组10只。分别以苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织病理改变；伊文氏蓝标记的白蛋白检测肺水清除率（AFC）；吉姆萨染色计数肺泡灌洗液（BALF）中总细胞数和多形核白细胞数；BCA法测BALF中蛋白含量，酶联免疫吸附实验（ELISA）检测BALF中白介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α，髓过氧化物酶（MPO）试剂盒检测MPO活性；Western blot检测肺组织α-ENaC蛋白表达和Akt磷酸化水平，实时荧光定量PCR（qPCR）检测肺组织α-ENaC mRNA转录水平。
　　结果：
　　1.与Control组相比，LPS组表现出典型的ARDS病理改变，肺损伤明显(P＜0.05)，湿干（W/D）比、BALF蛋白含量明显增高而AFC明显减弱(P＜0.05)，BALF细胞计数、髓过氧化物酶（MPO）活性、IL-1β和TNF-α水平明显升高（P＜0.05），而肺α-ENaC表达和Akt磷酸化水平显著下调(P＜0.05)。
　　2.与LPS组相比，Adipolin组肺损伤明显减轻（P＜0.05），W/D比、BALF蛋白含量明显降低而AFC明显增强(P＜0.05)，且BALF细胞计数、MPO活性、IL-1β和TNF-α水平均较LPS组显著降低(P＜0.05)，伴α-ENaC表达和Akt磷酸化水平显著上调(P＜0.05)。
　　3.Wortmannin（PI3K抑制剂）组与Adipolin组相比，其肺损伤明显加重(P＜0.05)，W/D比、BALF蛋白含量明显增高，AFC明显减弱(P＜0.05)，BALF细胞计数、MPO活性、IL-1β和TNF-α水平明显升高（P＜0.05），同时伴α-ENaC表达和Akt磷酸化水平显著下调(P＜0.05)。
　　结论：
　　Adipolin/CTRP12可通过PI3K/Akt信号通路介导的α-ENaC上调机制，增强肺水肿液清除能力，从而对LPS所致ARDS小鼠发挥保护性调控作用。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1 材料和方法

1.1 材料

1.2 实验方法

1.3 统计学方法

2 实验结果

2.1 小鼠肺组织HE染色及损伤评分

2.2 小鼠肺组织W/D

2.3 小鼠BALF中蛋白含量

2.4 小鼠BALF中TNF-α含量

2.5 小鼠BALF中IL-1β含量

2.6 小鼠BALF中MPO活性

2.7 小鼠BALF细胞计数

2.8 小鼠肺泡液体清除率

2.9 小鼠肺组织α-ENaC mRNA转录及α-ENaC表达

2.10 小鼠肺组织α-ENaC、Akt、p-Akt蛋白表达

3 讨论

全文总结

参考文献

文献综述:Adipolin/CTRP12的研究进展

致谢

攻读学位期间发表的学术论文