自发性反复发作癫痫大鼠海马SNAREs表达改变对认知功能影响的实验研究

摘要

目的： 通过建立癫痫自发性再发作（Spontaneous recurrent seizures,SRS）模型，探讨可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体复合体（Soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptors complexes,SNAREs）是否与SRS所导致的认知功能障碍相关。 方法： 65只雄性SD大鼠，6-8周龄，随机分为对照组和实验组。其中，实验组通过腹腔注射红藻氨酸（Kainic acid,KA,10 mg/kg）以建立癫痫动物模型；随后根据SRS是否发生，部分大鼠腹腔注射丙戊酸（Valproic acid,VAP,200 mg/kg）并将实验组大鼠继续分为（KA-SRS）组，（KA+SRS）组及（KA+SRS+VAP）组。采用Morris水迷宫及旷场实验检测大鼠认知功能；电镜观察海马组织超微结构变化；RT-PCR法及Western-blot法测定海马组织中SNAREs复合体的表达情况；同时检测海马组织中Ca2+的含量。 结果： （1）实验组通过腹腔注射KA后，46只SD大鼠存活。根据 SRS评判标准，（KA-SRS）组15只，（KA+SRS）组16只及（KA+SRS+VAP）组15只。 （2）Morris水迷宫结果显示，（KA+SRS）组较对照组及（KA-SRS）组逃避潜伏期增加，跨平台次数减少；旷场实验结果显示（KA+SRS）组移动距离及中央区域停留时间延长；而（KA+SRS+VAP）组中以上指标均明显改善。 （3）电镜结果示，实验组胞浆肿胀，形态不规则，尤以（KA+SRS）组明显。 （4）与对照组（104.37±24.27 nmol/L）及（KA+SRS+VAP）组（138.48±29.75 nmol/L）相比，（KA+SRS）组（174.26±46.82 nmol/L）海马组织中Ca2+含量明显增加。 （5）RT-PCR及Western-blot结果显示，（KA+SRS）组海马组织中SNAREs复合体表达较对照组及（KA+SRS+VAP）组显著降低。 结论: 自发性反复发作癫痫大鼠海马区SNAREs表达降低与认知功能障碍有关。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1.1 实验仪器

1.2 实验试剂

1.3 主要试剂配制

1.4 实验动物及饲养

1.5 癫痫模型建立

1.6 Morris水迷宫试验

1.7 旷场实验

1.8 海马组织超微结构观察

1.9 Western-blot法检测SNAP-25、Syp及Syt-1 蛋白表达

1.10 RT-PCR法检测SNAP-25、Syp及Syt-1蛋白表达

1.11 海马组织内Ca2+含量检测

1.12 统计学分析

2 结果

2.1 一般状况观察

2.2 SRS对认知功能的影响

2.3 旷场实验

2.4 SRS对海马组织超微结构的影响

2.5 海马组织中SNAREs表达变化

2.6 海马内Ca2+含量改变

3 讨论

参考文献

文献综述:癫痫与认知功能相关性研究进展

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术论文