肝/肾/骨型碱性磷酸酶基因ALPL抑制卵巢癌的增殖

摘要

目的： 研究肝/肾/骨型碱性磷酸酶基因ALPL（alkaline phosphatase,liver/bone/kidney）在卵巢癌细胞株和临床组织样本中的表达及其对卵巢癌细胞株增殖的影响及其可能机制。 方法： 通过qRT-PCR和Western Blot检测 ALPL在卵巢癌组织及细胞中表达水平，并与正常卵巢组织进行比较。在低表达ALPL的卵巢癌细胞株SKOV3中外源性过表达ALPL，通过MTT法、平板克隆实验检测细胞的增殖，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡。通过建立裸鼠皮下种植瘤模型，观察过表达ALPL在体内的成瘤能力。并通过免疫印迹实验检测经典Wnt信号通路中的关键分子的表达及其影响卵巢癌恶性增殖的潜在机制。 结果： ALPL在卵巢癌中呈低表达，体内外实验证明外源性过表达ALPL可抑制卵巢癌细胞株SKOV3的增殖和成瘤能力，并抑制经典Wnt/β-catenin信号通路。 结论： ALPL可能在卵巢癌中发挥一个抑癌基因的作用，并通过经典的Wnt/β-catenin抑制卵巢癌细胞株SKOV3的增殖。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1 材料和方法

1.1 细胞株及培养

1.2 临床组织样本

1.3 主要试剂

1.4 RNA 提取和实时定量qRT-PCR

1.5 5-Aza 和TSA 处理

1.6 慢病毒构建与包装

1.7 细胞感染及稳转株筛选

1.8 克隆形成实验

1.9 MTT法检测细胞活性

1.10 流式细胞仪检测细胞周期和凋亡

1.11 免疫印迹实验

1.12 裸鼠体内实验

1.13 免疫组化

1.14 细胞免疫荧光实验

1.15 统计学分析

2 结果

2.1 ALPL在不同卵巢癌细胞株和组织中均呈低表达。

2.2 甲基化影响卵巢癌细胞中ALPL的表达

2.3 外源性过表达ALPL的验证及其对卵巢癌细胞增殖、周期与凋亡的影响

2.4 ALPL抑制卵巢癌裸鼠皮下成瘤能力

2.5 ALPL可能通过抑制经典Wnt信号通路发挥对卵巢癌细胞株的抑癌作用

3 讨论

结论

参考文献

文献综述:ALPL的研究进展

致谢

攻读学位期间的研究成果及发表的学术论文