声明
英汉缩略语名词对照
前言
参考文献
第一部分 构建稳定表达HBx的肝前体细胞株及动物模型
1实验材料
1.1细胞
1.2动物
1.3主要仪器
1.4主要试剂
1.5主要试剂配制
2实验方法
2.1细胞培养
2.2感染HBx肝前体细胞株的构建
2.3动物模型的构建
2.4实时聚合酶链反应(Quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)
2.5蛋白质印迹法(Western blotting;WB)
2.6免疫组化法(Immunohistochemistry;IHC)
2.7统计分析
3实验结果
3.1 HBx在肝前体细胞中表达
3.2 HBx在小鼠模型中表达
4讨论
参考文献
第二部分 HBx抑制小鼠肝脏细胞凋亡并上调细胞周期调控因子的表达
1实验材料
1.1主要仪器
1.2主要试剂
2实验方法
2.1荧光TUNEL实验
2.2实时聚合酶链反应(Quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)
2.3蛋白质印迹法(Western blotting;WB)
2.4统计分析
3实验结果
3.1 HBx抑制小鼠肝脏细胞凋亡
3.2 HBx下调促凋亡因子caspase-9和Bad的表达,上调抗凋亡因子Bcl-xl的表达
3.3 HBx上调肝脏细胞周期调控因子CDK2、cyclinD1和cyclinE的表达
4讨论
参考文献
第三部分 HBx影响小鼠肝脏细胞凋亡和周期调控因子表达的分子机制
1实验材料
1.1主要仪器
1.2主要试剂
2实验方法
2.1 HBx-EGFP-14-19组小鼠喂养Akt磷酸化抑制剂MK-2206
2.2荧光TUNEL实验
2.4蛋白质印迹法(Western blotting;WB)
3实验结果
3.1 HBx上调p-Akt、p-mTOR的表达
3.2 MK-2206作用于HBx-EGFP-14-19组小鼠使肝脏细胞p-Akt、p-mTOR表达水平降低
3.3 MK-2206可显著扭转HBx对小鼠肝脏的抗凋亡作用
3.4 MK-2206可显著扭转HBx下调促凋亡因子caspase-9和Bad的表达,上调抗凋亡因子Bcl-xl的表达的作用
3.5 MK-2206可显著扭转HBx上调小鼠肝脏细胞周期调控因子CDK2、cyclinD1和cyclinE表达的作用
4讨论
参考文献
全文总结
文献综述:HBx在原发性肝癌中的研究现状
致谢
攻读硕士期间发表论文