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PRR11相互作用蛋白的筛选与初步分析

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前言

1.材料与方法

1.1材料

1.1.1实验细胞、质粒和菌种

1.1.2试剂和材料

1.2实验方法

1.2.1采用酵母双杂交技术筛选PRR11的相互作用蛋白

1.2.2细胞培养

1.2.3间接免疫荧光分析

1.2.4免疫印迹

1.2.5免疫共沉淀

1.2.6 RNA提取和定量RT-PCR

1.2.7细胞增殖分析

1.2.8细胞迁移分析

1.2.9统计分析

2.结果

2.1 采用酵母双杂交技术筛选PRR11的相互作用蛋白

2.1.1诱饵载体的构建

2.1.2重组诱饵蛋白自激活检测和功能检测

2.1.3 PRR11突变体构建及自激活检测

2.1.4文库筛选和阳性克隆鉴定

2.1.5阳性克隆的回转验证

2.2 PRR11与RNF41相互作用的初步鉴定

2.3 PRR11和RNF41过表达对肺癌细胞STAT3通路的影响

2.4 PRR11和RNF41过表达对肺癌细胞STAT3靶基因转录的影响

2.5 PRR11和RNF41过表达对肺癌细胞增殖和迁移能力的影响

3.讨论

3.1 PRR11相互作用蛋白的筛选

3.2 PRR11调节STAT3通路的可能机制

3.3 下一步工作计划

参考文献

文献综述:IL6/JAK/STAT3信号通路

致谢

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