莲子心生物碱分离提取和定量测定新方法

摘要

莲子心系睡莲科莲属植物莲(Nelumbo nucifera Gaertn)成熟种子的干燥幼叶及胚根。性味苦寒,归心、肺、肾三经,具有清心去热,固精止血之功效。现代药理研究证明其还具有抗心律失常、抗心肌缺血、抗血小板聚集、增强抗肿瘤及提高免疫功能的功效。目前,国内外关于莲子心提取工艺的优化研究并不系统。但从莲子心的多种功效,多种用途可以看出,必须从整体观念出发,对莲子心的提取优化进行全面系统的研究,本文采用现代提取分离新技术结合实验优化设计方法,研究了莲子心生物碱提取的工艺条件并寻求更加精确的定量测定技术,为中药质量控制提供新思路。本论文主要包括以下几方面:
　　提取方法建立。为了提高莲子心生物碱的提取率,系统研究了不同提取溶剂和方法对其提取的影响:本部分采用了酸水类、醇类、亲脂性有机溶剂类等多种溶剂和多种提取方法(如加热回流提取法、冷浸法、超声提取法、索氏提取法、微波提取法等)对莲子心中生物碱的提取率进行了全面的比较研究。结果表明:超声提取法费时少,操作简单;选用70％乙醇为有机溶剂,超声提取生物碱提取率最高,提取率为112.87mg/g;而微波提取亦有较好的提取效果,故本研究主要采用超声提取法和微波提取法对莲子心中生物碱的提取工艺进行进一步研究。
　　超声法提取生物碱的影响因素优化及数学模拟研究。在单因素试验基础上,采用中心复合响应面分析等现代数据处理方法对超声辅助提取莲子心中总生物碱的工艺条件进行了优化,使用了多元二次回归方法作为函数估计的工具,将多因子实验中因素与指标的相互关系用多项式近似拟合,并依此对函数的响应面和等高线进行分析,从而得出最佳提取工艺条件为:超声波处理时间40min,乙醇浓度64.4％,料液比1:40.4。模型预测可达到128.695mg/g。在上述条件下,莲子心总生物碱的提取率可以达到128.673mg/g,与模型预测值基本一致。并且超声波辅助提取具有操作简单、提取时间短、反应条件温和等优点,提取获得的生物碱很好的保持了其原有的功能特性。
　　微波协同半仿生优化莲子心总生物碱提取工艺研究。对微波和半仿生提取中影响生物碱提取率的pH值、乙醇浓度、料液比、微波功率和提取时间等因素进行了优化,得到微波最佳提取条件为35倍体积的65％乙醇,在680w的微波功率下进行2×30s。并得知莲子心总生物碱在两种提取方式协同作用时有更高的提取率,提取量达到128.540mg/g,为以后研究新方法提供思路。
　　三波长紫外分光法定量测定技术的研究。以单波长测定莲心总碱含量为基础,建立了三波长紫外分光光度法协同 Box-Behnken设计响应面分析处理方法优化莲心总碱的提取工艺及定量测定技术,采用非线性数学模型拟合的方式考察了各因素及其交互作用对莲子心总生物碱提取量的影响,消除了由于杂质及基线漂移所带来的定量误差,从而使实验数据更加精密可信。