针刺和神经干细胞联合治疗实验性脑性瘫痪的机制研究

摘要

目的：探讨针刺和神经干细胞（NSC）联合治疗对缺血缺氧性脑损伤（HIBD）幼鼠肢体运动功能、学习和记忆能力、脑组织凋亡基因bax及抗凋亡基因bcl-2的蛋白表达和病理形态学的影响，并对针刺联合NSC疗法治疗实验性脑性瘫痪（CP）的机制进行探索，为临床小儿CP的治疗提供实验依据。 方法：⑴实验动物及分组：7日龄SPF级SD幼鼠68只（体重：12g～20g），随机选取12只作为①正常对照组；HIBD成功模型随机分成以下4组：②模型组；③单纯针刺组；④单纯NSC组；⑤针刺+NSC组，每组12只。⑵治疗阶段：包括针刺治疗和NSC治疗，其中NSC采用幼鼠尾静脉注射。⑶行为学检测：包括悬吊试验、斜坡试验和Y迷宫试验。⑷取材：术后21天对正常组和实验组幼鼠断颈取材，用HE染色法观察其海马组织病理形态学改变，并计数海马组织正常神经细胞数目；用TUNEL法检测其脑皮质神经细胞凋亡情况并测出凋亡神经细胞数目；免疫组化法检测其脑组织bcl-2、bax基因的蛋白质表达。⑸数据整理，统计学分析。 结果：①单纯针刺和单纯NSC均不能明显改善幼鼠的肢体运动功能和学习记忆能力；⑤针刺+NSC组与②模型组相比，各项均数差异有统计学意义（p＜0.05），表明针刺联合NSC能显著提高幼鼠的肢体运动功能和学习记忆能力（智力水平）。②针刺联合NSC能够明显促进抗凋亡基因bcl-2的蛋白质表达、抑制凋亡基因bax的蛋白质表达；③模型组左侧脑组织出现大面积坏死，空泡，右侧脑组织组织结构正常；④针刺+NSC组幼鼠海马变性神经细胞数量减少，病理形态学明显改善，针刺+NSC组海马变性神经细胞数目最少，脑组织病变程度最轻。⑤单纯针刺治疗和单纯NSC治疗都不能明显提高HIBD后幼鼠海马正常神经细胞数目；⑥单纯针刺和单纯NSC都不能明显抑制幼鼠脑皮质神经细胞凋亡，针刺联合NSC治疗可明显抑制幼鼠脑皮质神经细胞的凋亡。 结论：⑴单纯针刺或单纯NSC都不能明显改善缺血缺氧性脑瘫模型幼鼠肌力、随意运动、学习记忆能力（智力）。⑵针刺和NSC联合治疗对缺血缺氧性脑瘫模型幼鼠的肌力增长、随意运动的恢复、学习和记忆能力（智力）的改善有明显效果。⑶针刺和NSC联合治疗对缺血缺氧性脑瘫模型幼鼠脑组织细胞凋亡基因bax的蛋白质表达有明显的抑制作用、对抗凋亡基因bcl-2的蛋白质表达有明显的促进作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词索引

声明

前言

材料和设备

方法和步骤

实验流程图

结果

讨论

四 结 论

五 附 图

六 参考文献

七 综述 小儿脑瘫与神经干细胞移植治疗研究进展

附：在校期间发表文章

八 致谢