光信号在微生物区分与药物抗菌活性研究中的应用

摘要

众所周知，通过物质对光的吸收、散射和发荧光、发磷光等现象，可以对物质进行定性和定量测定。本文主要利用从荧光分光光度计上获得的光散射信号对微生物进行了区分，利用流式细胞仪上获得的荧光信号研究了改性头孢噻肟和细胞型朊蛋白(PrPc)的抑菌活性。具体研究内容如下： 1、利用光散射信号对微生物进行区分 光的散射信号发生在光与粒子的相互作用过程中，它与散射粒子的大小、形态、折光指数等方面有关。本文在配有偏振片的普通荧光分光光度计上保持激发和发射波长相等，通过同时扫描激发和发射单色器获得的光散射光谱对大肠杆菌Escherichia coli(E．coli)的2种不同菌株：Ecoli(DH5a)，Ecoli(BL-21)进行了探索性研究。结果表明，偏振同步光散射可以区分、表征这西种微生物，该方法简便、灵敏、快速。 2、利用流式细胞仪上获得的荧光信号研究药物的抑菌活性 流式细胞仪既可以检测样品的散射信号，也可以检测样品的荧光信号。本文利用流式细胞仪上获得的荧光信号对药物的抑菌活性进行了研究。 (1)在头孢噻肟(Cefotaxime Sodium)7位侧链的氨基上通过戊二醛的偶联作用修饰上壳聚糖，将修饰及朱修饰的头孢噻肟分别与金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，S.aureus)孵育后，用碘化丙锭(Propidium Iodide，PI)染色，然后利用流式细胞仪检测样品荧光强度的变化。结果表明，头孢噻肟改性后对金黄色葡萄球菌的抑菌活性增强了。本文同时研究了不同温度对头孢噻肟改性后抑菌活性的影响，发现在60℃下所得的改性头孢噻肟的抑菌活性最强。另外也研究了改性头孢噻肟在不同浓度和不同作用时间下与S.aureus的作用情况，这将为临床给药提供一定依据。 (2)利用流式细胞仪探索了细胞型朊蛋白(PrPc)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，S aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis，B．subtilis)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium,B，megaterium)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,B．thuringiensis)、大肠杆菌[Escherichia coli(BL-21)，E．coli(BL-21)]这五种随机所选细菌的抑菌活性，结果表明，细胞型朊蛋白(PrPc)对S.aureus和B．subtilis具有明显的抑制活性，而对B．megaterium，B．thuringiensis和E．coli(BL-21)这三种菌没有抑制活性，这将对抗菌肽的开发和细胞型朊蛋白(PrPc)的生理功能的阐明提供一定的实验依据。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:缩写符号对照表

声明

第一章绪论

§1.1光散射现象简介

§1.2共振光散射技术及应用简介

§1.3流式细胞术及流式细胞仪简介

§1.4流式细胞术的应用

§1.5本文拟达到的目的和研究内容

第二章偏振同步光散射用于微生物区分的研究

§2.1引言

§2.2实验部分

§2.3结果与讨论

§2.4结论

第三章流式细胞术应用于改性头孢噻肟抑菌活性的研究

§3.1引言

§3.2实验部分

§3.3结果与讨论

§3.4结论

第四章流式细胞术应用于PrPc抑菌活性的初步探索

§4.1引言

§4.2实验部分

§4.3结果与讨论

§4.4结论

第五章全文总结及展望

§5.1全文结论

§5.2前景展望

参考文献

硕士期间发表的论文

致谢