双花颗粒对小鼠实验性肝损伤的保护作用

摘要

目的：
　　 本实验团队以秀山金银花为主要原料自主研制成双花颗粒制剂。本文对双花颗粒抗肝损伤作用及作用机理进行了研究，观察双花颗粒对分别由四氯化碳和酒精诱导的急性肝损伤小鼠的保护作用。为充分开发双花颗粒的保肝作用，研制开发抗肝损伤新药提供理论基础。
　　 方法：
　　 1.双花颗粒对CCl4诱导的小鼠化学性肝损伤的保护作用
　　 将ICR雄性小鼠60只，按体重随机分为6组：空白对照组、CCl4模型组、硫普罗宁阳性对照组(250mg·Kg-1·bw-1)，双花颗粒低、中、高剂量组(1.25,2.5,5.0g·Kg-1·bw-1)。每天灌胃2次，空白对照组和模型对照组分别灌胃等容积的生理盐水。连续14d。第14d给药1小时后，除空白对照组外其余各组小鼠按体重均腹腔注射0.10％CCl4橄榄油溶液20mL/kg造模。禁食不禁水，18h后，称量体重，摘眼球取血，3000r/min离心15分钟，取血清，测血中AST、ALT的活性。并快速取出肝脏，称重，计算肝指数。距肝大叶边缘0.5cm处取一小块肝组织，进行冰冻切片，HE染色，观察肝组织形态学改变。另制备10％的肝脏匀浆，测定肝组织中的SOD活性及MDA含量。
　　 2.双花颗粒对小鼠酒精性肝损伤的保护作用
　　 将ICR雄性小鼠60只，按体重随机分为6组：空白对照组、CCl4模型组、联苯双酯阳性对照组(150mg·Kg-1·bw-1)，双花颗粒低、中、高剂量组(1.25,2.5,5.0g·Kg-1·bw-1)，空白对照组和模型对照组分别灌胃等容积的生理盐水。11:00除空白对照组外其余的小鼠按16 mL/kg灌胃56°红星二锅头白酒。每天2次。连续14d，末次给药后，按照1的方法进行取材与指标的检测。
　　 结果：
　　 1.双花颗粒对CCl4诱导的小鼠化学性肝损伤的保护作用
　　 结果显示，模型组与正常对照组比较，肝脏指数显著升高，血清ALT及AST活性均明显增高，肝组织匀浆中丙二醛含量明显增高，SOD活性显著下降(P＜0.01)。模型组小鼠肝细胞索排列紊乱，多数肝细胞呈细胞水肿，出现脂肪变性，可见肝细胞片状坏死并伴有炎细胞浸润，上述结果表明小鼠急性肝损伤实验动物模型建立成功。
　　 双花颗粒低、中、高剂量组(1.25,2.5,5.0g·Kg-1·bw-1)与模型组相比，小鼠肝脏指数下降，除中剂量组外，高、低组均与模型组比较，差异显著，(P＜0.05)，血清ALT、AST明显降低(P＜0.05)，双花颗粒中剂量和高剂量给药组可极显著提高肝组织SOD的活性(P＜0.01)，降低肝损伤小鼠肝组织MDA含量(P＜0.05)。
　　 HE切片显示：与模型组比较，各治疗组均有明显的改善，肝细胞的坏死、脂肪变性、细胞水肿及炎性浸润等病理改变减轻，双花颗粒高剂量组效果好于其它治疗组，该组中大多数小鼠未见脂肪变性和肝细胞坏死现象。
　　 2.双花颗粒对小鼠酒精性肝损伤的保护作用
　　 结果显示，模型组与正常对照组比较，肝脏指数显著升高，血清ALT及AST活性均明显增高，肝组织匀浆中丙二醛含量明显增高，SOD活性显著下降(P＜0.01)。HE染色显示，模型组小鼠肝细胞结构模糊，肝细胞索排列紊乱，肝小叶结构不清，可见多处肝细胞坏死病灶，大部分细胞胞浆出现不同程度疏松，可见形成大量脂滴空泡，肝小叶中央及坏死区炎性细胞浸润明显。上述结果表明小鼠急性肝损伤实验动物模型建立成功。
　　 双花颗粒低、中、高剂量组(1.25,2.5,5.0 g·Kg-1·bw-1)与模型组相比，小鼠肝脏指数均显著降低(P＜0.05)，血清中ALT明显降低(P＜0.01)，AST活性相比模型组有显著的降低(P＜0.05)。双花颗粒中剂量和高剂量给药组可极显著提高肝组织SOD抗氧化酶的活性(P＜0.05)，降低肝损伤小鼠肝组织MDA含量(P＜0.05)。
　　 HE切片显示：跟模型组相对照，各剂量给药组均不同程度的改善小鼠的肝细胞坏死程度变性及炎性细胞浸润，双花颗粒能明显抑制脂肪变性，减少肝细胞的脂滴数量。双花颗粒高剂量组效果好于其它治疗组，该组中大多数小鼠未见明显的脂肪变性和肝细胞坏死现象。
　　 结论：
　　 双花颗粒能够抵抗CCl4所致小鼠急性肝损伤。
　　 双花颗粒对酒精诱导的小鼠急性肝损伤有一定的保护作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：主要中英文对照缩略词表

声明

前言

第一章双花颗粒对小鼠化学性肝损伤的保护作用

1.1试验材料

1.1.1实验动物

1.1.2药品与试剂

1.1.3主要仪器

1.2试验方法

1.2.1小鼠急性CCl4肝损伤模型的建立

1.2.2动物分组及药物处理

1.2.3待测样本采集及处理

1.2.4指标观察与检测

1.3结果与分析

1.3.1双花颗粒对CCl4诱导的化学性肝损伤小鼠肝脏指数的影响

1.3.2双花颗粒对CCl4诱导的化学性肝损伤小鼠血清中AST、ALT活性影响

1.3.3双花颗粒对CCl4诱导的化学性肝损伤小鼠肝组织中SOD活性和MDA含量的影响

1.3.4双花颗粒对CCl4诱导的化学性肝损伤小鼠肝脏组织形态学的影响

1.4讨论

第二章双花颗粒对小鼠酒精性肝损伤的保护作用

2.1试验材料

2.1.1实验动物

2.1.2药品与试剂

2.1.3主要仪器

2.2试验方法

2.2.1小鼠酒精性肝损伤模型的建立

2.2.2动物分组及药物处理

2.2.3待测样本采集及处理

2.2.4指标观察与检测

2.3结果与分析

2.3.1双花颗粒对酒精诱导的肝损伤小鼠肝脏指数的影响

2.3.2双花颗粒对酒精诱导的肝损伤小鼠血清中AST、ALT活性影响

2.3.3双花颗粒对酒精诱导的肝损伤小鼠肝组织中SOD活性和MDA含量的影响

2.3.4双花颗粒对酒精诱导的肝损伤小鼠肝脏组织形态学的影响

2.4讨论

结论

创新与思考

参考文献

文献综述

1 肝损伤分子机制以及抗肝损伤药物研究进展

1.1肝损伤的常见致病因素和发病机理

1.2肝损伤的分子机制

1.3肝损伤与肝细胞凋亡

2 肝损伤防治药物的研究概况

2.1抗病毒类药物

2.2免疫调节类药物

2.3改善肝功能药物

2.4中草药及其有效成分

3.金银花的化学成分、药理作用研究及其进展

3.1金银花的化学成分

3.2金银花的主要药理作用

综述参考文献

致谢

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