黑麦草种植对烟田土壤微生物群落结构的影响

摘要

本试验于2008年3月至2009年11月，在重庆市酉阳县板溪乡的烟草科技示范园内，采用平板涂抹法研究了以种植黑麦草为主的绿肥对烟草根围土壤细菌、真菌、放线菌及拮抗放线菌数量影响，并根据菌体形态、培养特征及生理生化指标，对土壤细菌、真菌和拮抗放线菌进行了鉴定，以此来反映绿肥种植对土壤微生物群落结构的影响。
　　 本试验的研究结果如下：
　　 1.黑麦草种植对烟田土壤微生物数量的影响2008年绿肥田(未种植绿肥)和对照田的烟草根围土壤微生物数量的季节动态变化趋势一致，且各生育期不同田块的同一类微生物数量相当，均于现蕾期达到数量峰值，此时土壤细菌、真菌和放线菌的均值分别为6.87×106个/克干土，4.91×104个/克干土，9.41×105个/克干土。2009年种植黑麦草的绿肥田和对照田的土壤细菌数量于8月23日前后(成熟期)达到峰值，绿肥田土壤细菌的均值为12.20×106个/克干土，明显高于同年对照田的6.61×106个/克干土，同时也高于上一年同一田块土壤细菌的数量，说明黑麦草的种植有利于土壤细菌数量的增加。种植黑麦草的绿肥田，在烟草各生育期，土壤真菌数量均明显高于对照田。绿肥田和对照田的土壤真菌数量于成熟期(8月23日前后)达到峰值，绿肥田的均值为6.42×104个/克干土，明显高于对照田的2.43×104个/克干土，同时也高于上一年同一田块土壤真菌的数量，说明黑麦草的种植有利于土壤真菌数量的增加，效果显著。种植黑麦草的绿肥田，烟草移栽后，土壤放线菌的数量不断增加，在烟草采收后(10月15前后达到数量高峰值，均值为8.96×105个/克干土，稍高于对照田土壤放线菌的数量峰值，8.49×105个/克干土。
　　 2.黑麦草种植对烟田拮抗放线菌数量的影响绿肥田对烟草黑胫病菌具拮抗活性的放线菌菌株为29株，占分离菌株总数的40.3％，远大于对照田的20.0％，绿肥田具拮抗活性的菌株比例远高于对照田。绿肥田具较强拮抗活性的菌株有14株，占拮抗活性菌株数的48.3％，高于对照田的33.3％。绿肥田中BXL17的拮抗效果最好，抑菌带宽达到了25.7mm，略窄于对照田的27.8mm。绿肥田对烟草青枯病菌具拮抗活性的放线菌菌株为14株，占分离菌株总数的19.4％，大于对照田的13.3％，绿肥田具拮抗活性的菌株比例远高于对照田。绿肥田具较强拮抗活性的菌株有10株，占拮抗活性菌株数的71.4％，高于对照田的25％。绿肥田中拮抗效果最好的抑菌圈直径达44.0mm，远大于对照田最大抑菌圈直径26.0mm。总的来说，黑麦草种植后，促进了具拮抗烟草黑胫病菌、青枯病菌的土壤放线菌数量的增加。
　　 3.黑麦草种植对烟田拮抗放线菌类群的影响绿肥田具拮抗活性的放线菌类群多于对照田。绿肥田的12株具拮抗活性的放线菌菌株主要涉及到放线菌的5个属，其中链霉菌属有6个类群；对照田的6株具拮抗活性的放线菌菌株主要涉及到放线菌的3个属，其中链霉菌属有3个类群。
　　 4.黑麦草种植对烟田土壤微生物多样性的影响绿肥田烟草根围细菌以革兰氏阴性菌为主，分属于13个属，对照田中仅有绿肥田中的6个属。其中，假单胞菌属和芽孢杆菌属是绿肥田和对照田的优势菌属；对植物具有致病作用的，如欧文氏菌属、黄单胞菌属等细菌，多分布于对照田；而对植物病原菌具拮抗作用的有益细菌，如芽孢杆菌属、产碱菌属等多分布于绿肥田。种植黑麦草的绿肥田，与对照田相比，土壤细菌类群的多样性指数和丰富度指数要高，而类群的均匀度和优势度指数要低一些。绿肥田烟草根围真菌共涉及到9个属，其中曲霉属、青霉属和木霉属是优势菌属。而对照田只有其中的4个属。其中，青霉属和曲霉属是绿肥田和对照田的优势菌属。种植黑麦草的绿肥田，与对照田相比，土壤真菌类群的多样性指数和丰富度指数要高，而类群的优势度指数要低一些。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章 文献综述

1.1绿肥在农业生产中的作用

1.1.1提高土壤中氮磷钾等营养元素的含量

1.1.2改善土壤的理化性质

1.1.3防治土传病害

1.2土壤微生物多样性的研究方法

1.2.1传统的微生物培养法

1.2.2生物标记法

1.2.3 Biolog微平板法

1.2.4分子生物学法

引 言

第二章 黑麦草种植对烟田土壤微生物数量的影响

2.1试验材料

2.1.1供试品种

2.1.2供试培养基

2.1.3主要仪器

2.2田间试验设计

2.3试验方法

2.3.1土壤样品的采集和保存

2.3.2土壤中微生物的分离与计数

2.4.结果与分析

2.4.1黑麦草种植对烟田土壤细菌数量的影响

2.4.2黑麦草种植对烟田土壤真菌数量的影响

2.4.3黑麦草种植对烟田土壤放线菌数量的影响

2.5结论与讨论

第三章 黑麦草种植对拮抗放线菌数量的影响

3.1试验材料

3.1.1供试土样

3.1.2病原菌菌株

3.1.3供试培养基

3.2试验方法

3.2.1拮抗放线菌对烟草黑胫病菌的拮抗作用的测定

3.2.2拮抗放线菌对烟草青枯病菌的拮抗作用的测定

3.3结果与分析

3.3.1拮抗放线菌对烟草黑胫病菌的拮抗作用

3.3.2拮抗放线菌对烟草青枯病菌的拮抗作用

3.4结论与讨论

第四章 黑麦草种植对拮抗放线菌类群的影响

4.1试验材料

4.1.1菌株

4.1.2培养基

4.1.3主要试剂

4.2试验方法

4.2.1形态特征与培养特性

4.2.2革兰氏染色

4.2.3生理生化测定

4.3结果与分析

4.3.1菌丝体及孢子特征结果

4.3.2革兰氏染色及生理生化的鉴定结果

4.4结论与讨论

第五章 黑麦草种植对烟田土壤微生物多样性的影响

5.1试验材料

5.1.1供试菌株

5.2试验方法

5.2.1细菌鉴定方法

5.2.2真菌鉴定方法

5.2.3土壤微生物的多样性分析

5.3结果与分析

5.3.1黑麦草种植对烟草根围细菌种群的影响

5.3.2黑麦草种植对烟草根围细菌种群多样性的影响

5.3.3黑麦草种植对烟草根围真菌种群的影响

5.3.4黑麦草种植对烟草根围真菌种群多样性的影响

5.4结论与讨论

5.4.1黑麦草种植对烟草根围细菌种群多样性的影响

5.4.2黑麦草种植对烟草根围真菌种群多样性的影响

第六章 结论与展望

6.1结论

6.2展望

参考文献

致 谢

硕士期间发表的论文

附 录