补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓组织血小板活化因子受体mRNA表达的影响

摘要

目的：探讨补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction,BYHWD)在脊髓损伤(SpinalCord Injury,SCI)中对大鼠脊髓组织血小板活化因子受体(Platelet ActivatingFactor-Receptor,PAF-R)mRNA表达的影响，从分子水平探讨BYHWD防治SCI的作用靶点及防治机理，阐明BYHWD促进神经损伤修复的临床应用价值，为传统中药复方的临床应用提供实验依据。 方法：应用SPF级Wistar大鼠，体重(195±10)g，雌雄各半。实验大鼠先按性别分层，然后根据体重采用随机数字表法分组，其中正常组(Group A)16只，其它实验大鼠采用Allen’s打击法制作中度SCI模型。造模完成后先观察伤情，待伤情稳定后，参照改良Tarlov评分标准，选择后肢运动功能障碍评分为2～3分的模型大鼠48只，分为模型空白组(Group B)、BYHWD组(Group C)、金纳多组(Group D)，每组16只模型大鼠。观察1w后，BYHWD组给予BYHWD40g/kg·W，金纳多组给予金纳多45.5mg/kg·W；正常组及模型空白组给予相同体积的蒸馏水，用药2w结束实验。于造模前(即0d)、造模后3d、1w、2w、3w，对实验大鼠进行称重；同时采用Tarlov评分标准评价各组大鼠后肢运动功能恢复情况。用药结束后，采用酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测血浆血小板活化因子(Platelet Activating Factor,PAF)含量；采用RT-PCR法检测脊髓组织PAF-RmRNA表达量。 结论：(1)SCI后，模型大鼠的体重和后肢运动功能均明显降低，BYHWD给药后可显著改善模型大鼠的后肢运动功能，促进大鼠体重恢复和增长；(2)SCI后，由于PAF的过度生成及异常释放，内源性PAF含量明显增多，而BYHWD可显著降低SCI大鼠血浆PAF含量；(3)SCI后，模型大鼠脊髓组织PAF-R mRNA的表达量明显降低，BYHWD可进一步抑制其表达，以减轻大量PAF对脊髓组织的继发性损伤：(4)BYHWD通过降低内源性PAF含量，并抑制脊髓组织PAF-RmRNA的表达，从而阻断PAF的继发损害效应，促进脊髓神经功能的恢复，是该方治疗中医“痿证”的作用机理之一。

目录

声明

1前言

1.1研究背景

1.2研究目的

1.3研究内容

2材料与方法

2.1实验动物及实验条件

2.2实验设计与分组

2.3实验药物、试剂与设备

2.3.1实验药物和制备方法

2.3.2实验主要试剂

2.3.3实验主要仪器设备

2.4实验方法

2.4.1BYHWD及金纳多水溶液的制备及给药方法

2.4.2模型制作及处理

2.4.3取材

2.5检测指标

2.5.1大鼠体重

2.5.2后肢运动功能Tarlov评分标准

2.5.3血浆PAF含量测定

2.5.3脊髓组织PAF-R mRNA表达量测定

2.6统计学方法

3结果

3.1体重变化

3.2后肢运动功能Tarlov评分

3.3血浆PAF含量

3.4脊髓组织PAF-R mRNA的表达量

4讨论

4.1脊髓继发性损伤的病理机制

4.2 PAF在脊髓继发性损伤中的生物效应及其信号转导机制

4.3 BYHWD治疗SCI的中医理论及现代实验基础

4.4 BYHWD对SCI大鼠的体重及后肢运动功能的影响

4.5 BYHWD对SCI大鼠血浆PAF含量的影响

4.6 BYHWD对SCI大鼠脊髓组织PAF-R mRNA表达量的影响

4.7本课题的研究意义及进一步构想

5结论

参考文献

文献综述 脊髓损伤中血小板活化因子的变化及作用

致谢

附录