17beta-雌二醇调节睾丸支持细胞G1/S期转化的机制

摘要

睾丸支持细胞(Sertoli cell，SC)是由意大利组织学家Sertoli于1865年发现的。睾丸支持细胞(Sertoli cell，SC)能为哺乳动物睾丸生精能力提供结构支撑，还能为生精细胞的分化成熟提供营养物质；其血睾屏障使生精细胞受到良好的保护。通常每个睾丸支持细胞能支持生精细胞的数量是有限的，因此成年动物睾丸支持细胞的数量决定了睾丸的最终大小和产生精子的数量。
　　 雌激素在调节睾丸支持细胞增殖中具有十分重要的作用，Skp2和CyclinA2参与了睾丸支持细胞的增殖，但雌激素调节Skp2和CyclinA2表达的机制仍不清楚。本研究的目的是确定雌激素是否通过雌激素受体和cAMP-细胞外调节的蛋白激酶(ERK1/2)调节培养条件下未成熟仔猪睾丸支持细胞中skp2蛋白和mRNA，以及CyclinA2 mRNA的表达。
　　 本研究以培养的仔猪睾丸支持细胞为实验材料，通过添加雌激素受体抑制剂以及各种信号通路的抑制剂，应用western blot检测Skp2蛋白含量，并用实时荧光定量PCR检测Skp2和CyclinA2 mRNA的相对表达量。
　　 实验结果发现：
　　 (1)17beta-雌二醇(10-9 mol/L)以时间依赖的方式促进了Skp2蛋白和mRNA，以及CyclinA2 mRNA的表达(P<0.05)，这一作用在30min时到达到高峰。
　　 (2)雌激素非特异性受体抑制剂ICI182780、雌激素受体beta抑制剂(ERbetaAnt)和雌激素受体alpha抑制剂(ERalphaAnt)单独作用对Skp2蛋白，mRNA和CyclinA2 mRNA的表达与空白对照相比没有显著影响(P>0.05)，但ICI182780与ERbetaAnt，而不是ERalphaAnt抑制了17beta-雌二醇诱导的Skp2蛋白，mRNA和CyclinA2 mRNA的表达(P<0.05)。
　　 (3)17beta-雌二醇(10-9mol/L)和Forskolin均促进了Skp2蛋白，mRNA和CyclinA2 mRNA的表达(P<0.05)，而Rp-cAMP、H-89和U0126都抑制了17beta-雌二醇(10-9mol/L)的活性P(<0.05)，但三种抑制剂单独作用时对Skp2蛋白，mRNA和CyclinA2 mRNA的表达与空白相比没有显著影响(P>0.05)。
　　 结论：
　　 17beta-雌二醇主要通过ERbeta受体、影响cAMP的产生和ERK1/2激活，调节Skp2蛋白，mRNA和CyclinA2 mRNA的表达，进而影响睾丸支持细胞G1/S期转化。