L-苹果酸对吉富罗非鱼胃肠道结构功能及肝脏TCA循环效率的影响

摘要

本论文首先介绍了国内外苹果酸的营养研究进展概述，着重综述了国内外关于苹果酸对动物体营养生理作用的研究结果及最新进展，并以我国主要经济养殖种类罗非鱼(Oreochromis niloticus)为研究对象，通过在基础日粮中添加不同水平的L-苹果酸，研究L-苹果酸对罗非鱼胃肠道结构、功能及肝脏TCA循环的影响，确定出罗非鱼L-苹果酸的适宜添加量，并探讨L-苹果酸对罗非鱼的作用机理，为苹果酸在罗非鱼饲料中的应用及酸化剂的配制提供理论基础，也为其他鱼类饲料酸化剂研究提供重要参考。
　　试实选取体质量（37.94±0.09）g吉富罗非鱼幼鱼420尾，随机分为7个处理（每个处理3个重复，每个重复20尾鱼），分别饲喂添加0（对照）、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0和32.0 g/kg L-苹果酸的饲料，进行为期154 d的生长试验。饲养在容积0.38 m3(有效体积0.32 m3)的玻璃纤维水族缸中。饲养期间水温26～28℃，DO＞6.0 mg/L，pH6.5～7.0，氨氮＜0.05 mg/L，亚硝酸盐:0.009～0.020 mg/L。养殖试验结束后，研究L-苹果酸对罗非鱼胃肠道组织结构和功能及肝脏TCA循环效率的影响。研究结果总结如下:
　　(1)L-苹果酸对罗非鱼胃蛋白酶和泌酸能力的影响
　　随着日粮中L-苹果酸添加量的增加，罗非鱼胃蛋白酶活力也随之提高。在32g/kg组到达最大，较对照组活力提高了115.71％。除16.0g/kg组，H+-K+-ATPase活性其余各组均显著低于对照组(P＜0.05)。
　　(2) L-苹果酸对罗非鱼胃EGF和EGFR的影响
　　表皮生长因子和表皮生长因子抗体含量随着日粮苹果酸水平的提高呈先上升后下降的趋势。在8.0g/kg组达到最大值，较对照组分别增加了56.30％和86.56％。
　　(3) L-苹果酸对罗非鱼胃组织结构的影响
　　通过扫描电镜观察到，随着苹果酸水平的增加，胃腔表面无破损现象。但是细胞间的间隙在8.0g/kg组中明显比对照组和32.0g/kg组更明显。通过透射电镜观察到粘膜上皮细胞基本呈现正常状态，无细胞破损。但是在32.0g/kg组中，发现有少数细胞胞质中出现了液泡。对胃腺体细胞的观察发现，对照组和8.0g/kg组细胞出现正常状态，但是在32.0g/kg组中部分细胞出现空化现象。而且少数细胞的线粒体出现空化，细胞核出现肿胀。
　　(4)L-苹果酸对罗非鱼肠道消化酶及Na+-K+-ATP酶的影响
　　随着L-苹果酸水平的增加，肠道淀粉酶和脂肪酶活性均呈先升高后下降的趋势，在1.0 g/kg组达到最大，分别比对照组增加了63.21％和37.22％;脂肪酶活性在2.0g/kg～32.0g/kg组间差异不显著(P＞0.05);肠蛋白酶呈逐渐升高趋势;Na+-K+-ATP酶活性呈先升后降的趋势，在16.0 g/kg组达到最大，较对照组增加了74.54％。
　　(5) L-苹果酸对罗非鱼肠道EGF和EGFR的影响
　　EGF和EGFR随L-苹果酸水平的增加显著升高（P＜0.05），均在16.0 g/kg达到最大，分别较对照组增加了35.21％和58.73％。
　　(6) L-苹果酸对罗非鱼肠道组织形态结构的影响
　　随着L-苹果酸水平的增加，前肠和中肠绒毛高度、密度、肌层厚度都呈先升高后降低的趋势，在16.0 g/kg组达到最大，分别较对照组提高了86.89％、41.94％、104.59％和115.42％、29.00％、19.40％。后肠绒毛高度、密度和肌层厚度则随着L-苹果酸水平的增加显著降低(P＜0.05)，在32.0 g/kg组达到最小值且显著低于对照组(P＜0.05）。
　　(7) L-苹果酸对罗非鱼肝脏柠檬酸合酶和ATP含量的影响
　　随着L-苹果酸水平的增加，柠檬酸合酶活力呈先升后降的趋势，8.0 g/kg组活性达到最高，较对照组增加23.49％; ATP含量随L-苹果酸的增加而逐渐增加。
　　本研究实验实验认为吉富罗非鱼饲料中适量添加L-苹果酸(1.0～8.0 g/kg)，能改善罗非鱼胃、前肠和中肠的形态结构，促进粘膜上皮细胞的增殖，提高胃肠消化和吸收能力，同时提高肝脏TCA循环效率。

目录

声明

摘要

第一章 文献综述

1．1 L-苹果酸的概述

1．1．1 L-苹果酸的理化特性

1．1．2 L-苹果酸的代谢意义

1．1．3 L-苹果酸的营养和生理功能

1．2 罗非鱼胃肠道结构特征

1．2．1 罗非鱼胃组织的结构功能特征

1．2．2 罗非鱼肠道组织的机构功能特征

1．3 L-苹果酸的营养研究进展

1．3．1 苹果酸在反刍动物中的研究

1．3．2 苹果酸在水产动物中的研究

1．4 展望

引言

第二章 材料与方法

2．1 试验日粮和试验设计

2．2 试验鱼与饲养管理

2．3 测定指标

2．3．1 胃生理生化指标测定

2．3．2 肠道生理生化指标测定

2．3．3 肝脏生理生化指标测定

2．3．4 肠道组织切片的观察

2．3．5 胃透射电镜和扫描电镜的观察

2．4 数据处理

第三章 结果

3．1 L-苹果酸对罗非鱼胃蛋白酶和泌酸能力的影响

3．2 L-苹果酸对罗非鱼胃EGF和EGFR的影响

3．3 L-苹果酸对罗非鱼胃组织结构的影响

3．4 L-苹果酸对罗非鱼肠道消化酶及Na+-K+-ATP酶的影响

3．5 L-苹果酸对罗非鱼肠道EGF和EGFR的影响

3．6 L-苹果酸对罗非鱼肠道组织形态结构的影响

3．7 L-苹果酸对罗非鱼肝脏柠檬酸合酶和ATP含量的影响

第四章 讨论

4．1 L-苹果酸对罗非鱼胃组织形态和功能的影响

4．2 L-苹果酸对罗非鱼肠道形态和功能的影响

4．3 L-苹果酸对罗非鱼肝脏TEA循环效率的影响

第五章 结论

参考文献

致谢

硕士期间发表论文及参加课题一览表