胎盘细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3与妊娠期高血压疾病的相关性分析

摘要

目的：通过检测妊娠期高血压疾病(Hypertensive disorder complicating pregnancy，HDCP)孕妇与正常孕妇胎盘细胞中细胞自噬相关蛋白Beclin1和微管相关蛋白1轻链(microtubule-associated protein1 light chain3，LC3)的表达，以探讨胎盘细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3与妊娠期高血压疾病的相关性，为进一步揭示妊娠期高血压疾病的的发病机制提供新的理论依据。 方法：研究对象共84例，按纳入标准分为，实验组:妊娠期高血压疾病组（妊娠期高血压组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组）、对照组:健康孕妇组。⑴实验组:选取2012年05月～2013年07月在广东省第二人民医院产科收治并剖宫产分娩的妊娠期高血压疾病病例42例，诊断参考中华医学会2012年妊娠期高血压疾病诊治指南，（单胎妊娠，排除孕妇既往有心、肝、肾、甲状腺疾病及血液病史，或有糖尿病、慢性高血压、自身免疫性疾病史、营养不良和缺氧状态）。⑵对照组:选取同期在广东省第二人民医院剖宫产分娩正常孕妇组42例。⑶选取上述84例病例的胎盘娩出后立即行石蜡包埋进行试验，采用免疫组织化学法检测各组胎盘细胞中Beclin1和LC3的表达，双缩脲蛋白比色法测子痫前期孕妇孕前24h尿蛋白定量，并记录子痫前期病例新生儿出生体重。免疫组织化学结果采用IPP6.0（自动图像分析）软件进行定量分析，每张切片采用40×10倍镜下视野进行灰度测定，统计其积分光密度(IOD)。数据采用SPSS19.0统计软件进行统计学统计。两样本均数比较采用t检验，多样本均数比较采用单因素方差分析，相关性分析采用Pearson相关分析及直线回归分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。 结果：①Beclin1在两组胎盘细胞中均有表达，且Beclin1在实验组胎盘细胞中表达增强。在实验组胎盘细胞中，Beclin1高于对照组，两组间比较差异有统计学意义（t=10.631，P＜0.01）。LC3在两组胎盘细胞中均有表达，且LC3在实验组胎盘细胞中表达增强。在实验组胎盘细胞中，LC3高于对照组，两组间比较差异有统计学意义（t=15.587，P＜0.01）。②Beclin1主要定位在滋养细胞、绒毛间质细胞的细胞膜、胞核、部分胞浆。LC3主要定位在滋养细胞、绒毛间质细胞细胞浆、部分胞核。③在实验组内的妊娠期高血压组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组胎盘细胞中，Beclin1呈上升趋势，重度子痫前期组最高，三者间差异有统计学意义（P＜0.05）。在实验组内的妊娠期高血压组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组胎盘细胞中， LC3呈上升趋势，重度子痫前期组最高，三者间差异有统计学意义（P＜0.05）。④在两组胎盘细胞中，Beclin1的表达和LC3的表达正相关(r=0.804，P＜0.05)。⑤子痫前期病例胎盘细胞Beclin1和LC3与24h尿蛋白定量正相关（r1=0.670，r2=0.739，P1＜0.05，P2＜0.05），与新生儿出生体重无相关性(r1=-0.181，r2=-0.094, P1＞0.05,P2＞0.05)。 结论：⑴Beclin1、LC3在不同组别胎盘细胞中均有表达。⑵Beclin1与LC3在胎盘细胞中表达的部位不同。⑶Beclin1、LC3在实验组胎盘细胞的表达高于对照组胎盘细胞的表达，提示Beclin1、LC3与妊娠期高血压疾病及其严重程度相关。⑷胎盘细胞中Beclin1的表达和LC3的表达正相关。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 研究背景

1．2 研究目的

1．3 研究内容

2 材料与方法

2．1 材料

2．2 实验方法

2．3 统计学处理

3 结果

3．1 各组一般情况比较

3．2 两组胎盘细胞Beclin 1和LC3表达水平的比较

3．3 相关性分析

4 讨论

4．1 Beclin 1、LC3的生物学特性及与细胞自噬的关系

4．2 胎盘细胞自噬与妊娠期高血压疾病

4．3 胎盘细胞Beclin 1、LC3与妊娠期高血压疾病

4．4 Beclin 1、LC3在妊娠期高血压疾病未来的预测和治疗上的展望

5 小结

参考文献

综述 胎盘细胞自噬和凋亡与妊娠高血压疾病

致谢

附录一：专有名词中英文对照

附录二：SPSS19．0统计结果输出

附录三：伦理委员会审查申请表

附录四：项目标本采集同意书

附录五：研究生期间科研情况