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【6h】

转化生长因子β1与肿瘤坏死因子对软骨终板细胞的作用

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摘要

1 前言

1.1 研究背景

1.2 研究目的

1.3 研究内容

2 实验研究

2.1 实验材料与方法

3 结果

4 讨论

5 小结与展望

参考文献

综述 椎间盘退变的基因治疗研究进展

致谢

缩写词中英文对照

在读硕士期间的科研情况

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摘要

目的:通过研究转化生长因子β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子(TNF)在退变模型软骨终板细胞中的表达,探讨软骨终板以及椎间盘退变的发病机制,为椎间盘退变疾病的预防和治疗提供新的途径。 方法:⑴健康雄性新西兰白兔20只,兔龄6~8月,体重2.5~3.0kg。⑵随机将动物平均分成2组:实验组与对照组。⑶用纤维环切开法制作新西兰白兔退变的椎间盘模型。⑷实验后8周取L4椎体下、L5椎体上软骨终板标本进行组织学HE染色观察、TUNEL染色、SP法免疫组化、RT-PCR检测、Western blot分析了解软骨细胞的凋亡与TGF-β1及TNF的表达情况。 结果:组织学HE染色评分结果:HE染色中实验组软骨终板细胞较对照组有一定数量的减少,并且体积较对照组变小,部分细胞出现细胞核染色变浅。TUNEL染色结果:凋亡软骨细胞的细胞核呈棕黄或棕褐色着色,多伴有核染色质边集或浓集,实验组软骨终板内平均TUNEL染色阳性细胞均高于对照组(P<0.05)。免疫组化评分结果:在免疫组织化学检测中,实验组TGF-β1高表达,TNF高表达,对照组TGF-β1与TNF均是低表达,实验组中TGF-β1阳性率高于对照组中的阳性率(P<0.05),实验组中TNF阳性率也高于对照组中的阳性率(P<0.05)。RT-PCR检测评分结果:RT-PCR检测TGF-β1 mRNA表达,与对照组软骨终板比较,实验组的TGF-β1 mRNA表达水平增加(P<0.05),RT-PCR检测TNF mRNA表达,实验组的TNF mRNA表达水平也高于对照组(P<0.05)。Western blot检测评分结果:TGF-β1蛋白在实验组的表达明显高于对照组(P<0.05),TNF蛋白在实验组的表达高于对照组(P<0.05)。 结论:⑴实验研究表明转化生长因子β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子(TNF)做为重要的细胞因子参与了软骨终板细胞的凋亡。⑵转化生长因子β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子(TNF)含量的增加诱导了软骨终板细胞的凋亡,两者具有协同作用。

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