荧光光谱法测定次氯酸盐、腺嘌呤和维生素C

摘要

随着人们生活水平的日益提高，对环境、健康、药品的关注越来越强烈。因此，建立灵敏度高、选择性好、简单快速地检测环境、药品中的有效成分的方法是一项有重要意义的工作。本文主要选择环境污染物次氯酸盐、人体病症前兆物腺嘌呤以及人体中不可或缺的维生素C作为定量分析对象，探究了硫酸耐尔蓝在表面活性剂溶液中与次氯酸盐的氧化还原反应、L-色氨酸与铜离子及腺嘌呤的相互作用、硫胺素在碱性条件下和K3[Fe(CN)6]及维生素C的作用，优化了反应条件，研究了荧光和紫外吸收光谱特征，探讨了荧光猝灭和增强机理，建立了检测次氯酸盐、腺嘌呤、维生素 C的荧光光谱法，并用于实际样品的检测，结果满意。主要研究内容如下：
　　1.荧光猝灭法测定水样中的ClO-
　　以硫酸耐尔蓝A为探针，建立了一种简单灵敏、选择性高的荧光光谱法检测ClO-。在pH2.0的BR缓冲溶液中，ClO-能有效地猝灭耐尔蓝的荧光，体系最大激发和最大发射波长分别位于634nm，686nm处。在优化实验条件下，荧光猝灭值（ΔF）与ClO-浓度在0.13-25.0μmol L-1范围内呈良好的线性关系。该方法灵敏度高，检出限（3σ/k）为0.04μmol L-1。基于此方法用于水样中ClO-的检测，回收率为95.0-104.8％。研究了荧光猝灭反应的适宜条件和影响因素，考察了共存物质的影响，表明方法具有良好的选择性，可用于ClO-的快速检测。此外，根据温度、荧光寿命、紫外-可见吸收光谱判断，该反应为静态猝灭反应。
　　2.荧光恢复法测定腺嘌呤
　　本研究基于L-色氨酸(L-Trp)荧光的猝灭及恢复，建立了荧光光谱法测定腺嘌呤（Ade）。在pH7.4 BR缓冲溶液中，L-Trp的最大激发波长和最大发射波长分别为λex/λem=290nm/364nm，Cu2+与L-Trp反应形成1:1的无荧光螯合物，从而导致L-Trp的荧光猝灭。当在L-Trp- Cu2+体系中加入Ade溶液后，后者参与对 Cu2+的竞争反应，Ade与Cu2+形成更稳定的无荧光的螯合物，部分 L-Trp被释放出来，使得体系的荧光得到恢复。在一定范围内，L-Trp的恢复荧光强度（ΔF）与Ade浓度呈良好的线性关系。方法的线性范围为（0.15-25）μmol L-1，相关系数为0.9994，检出限（3σ/K）为0.046μmol L-1。考察了共存物质的影响，表明方法具有良好的选择性，用于DNA中的Ade的测定，结果与HPLC法基本一致，加标回收率为96.0%-97.1%。文中讨论了荧光猝灭与恢复的机制。
　　3.荧光光谱法测定维生素C
　　提出了一种快速测定维生素C的荧光光谱法。研究发现，在碱性条件下，硫胺素能被K3[Fe(CN)6]氧化成一种带蓝色荧光的硫色素，其最大激发波长和最大发射波长分别为367nm、441nm。当维生素C加入到K3[Fe(CN)6]-硫胺素体系中，其荧光发生猝灭。在适宜条件下，猝灭的荧光强度（ΔF）与（0.086-1.5）μmol L-1范围内的维生素C的浓度成线性关系。检出限为0.026μmol L-1，低于相关报道的检测方法。将该法用于药片中维生素C的检测，结果满意。此外，探讨了反应的机理和荧光的猝灭机理。

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第1章 绪论

第1节 次氯酸根离子的性质及主要检测方法

1.1 次氯酸盐的性质及应用.

1.2次氯酸盐的主要测定方法

第2节 腺嘌呤的性质、应用及主要测定方法

2.1 腺嘌呤的性质

2.2 腺嘌呤的主要测定方法

第3节 维生素C的性质、应用及测定方法

3.1 维生素C的性质及应用

3.2 维生素C的主要测定方法

第4节 本文的主要研究内容及意义

参考文献

第2章 研究报告

第1节 基于荧光猝灭法检测水样中次氯酸根离子

1 实验部分

2 结果与讨论

3 分析应用

4 小结

参考文献

第2节 基于L-色氨酸 -Cu2+螯合物荧光猝灭的恢复检测腺嘌呤

1 实验部分

2 结果与讨论

3 分析应用

4 小结

参考文献

第3节 基于硫胺素 - 铁氰化钾体系应用荧光光谱法检测维生素C

1 实验部分

2 结果与讨论

3 分析应用

4 小结

参考文献

致谢

硕士期间发表的论文