口虾蛄乙酸乙酯提取物对肝癌HepG2/ADM多药耐药逆转及其机制的研究

摘要

目的：研究口虾蛄乙酸乙酯提取物(ESO)对人肝癌多药耐药细胞系HepG2/ADM和其亲本细胞系HepG2的生长抑制作用，并对其多药耐药(MDR)逆转机制的探讨。 方法：MTT法检测ESO对HepG2细胞与肝癌HepG2/ADM细胞的生长影响;流式和激光共聚焦技术检测ESO对荧光染料罗丹明123(Rh123)在胞内的蓄积和外排;免疫荧光法检测用药24h后细胞膜P-gp蛋白表达的影响;Western blot方法研究ESO作用细胞24h后，对MDR1基因表达的P-gp蛋白、MAPK通路中的ERK1/2和P-ERK1/2蛋白表达的影响;逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测细胞MDR1基因mRNA、P-ERK1/2基因的mRNA的表达情况。 结果：ESO作用HepG2与HepG2/ADM细胞后，其生长均被抑制;随着药物浓度的增大，抑制率逐渐增加。且在同一浓度下，HepG2细胞被抑制表现得更明显。流式结果显示ESO减少对耐药细胞系HepG2/ADM中Rh123的外排量，HepG2细胞无影响。激光共聚焦结果显示ESO增加Rh123在HepG2/ADM细胞体内的蓄积且减少外排，对HepG2细胞无影响。ESO作用耐药细胞HepG2/ADM后，Western blot结果显示，P-gp蛋白表达下调，P-ERK1/2蛋白表达上调(P＜0.05);RT-PCR结果显示MDR1基因mRNA表达下降(P＜0.05），P-ERK1/2基因mRNA表达增加(P＜0.05)，并呈剂量依懒性。 结论：ESO对HepG2和HepG2/ADM细胞均有生长抑制作用。ESO能逆转HepG2/ADM细胞的多药耐药的产生，主要机制与降低P-gp蛋白的表达，上调P-ERK1/2 mRNA的表达有关。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 研究背景

1．2 研究目的

1．3 研究内容

2 材料与方法

2．1 实验材料

2．2 实验方法

3 结果

4 讨论

5 小结

参考文献

综述 多药耐药基因及相关耐药蛋白在肿瘤中的研究进展

致谢

附录一：缩写词中英文对照

附录二：在读期间的科研情况