胰岛素样生长因子-1对高糖诱导H9c2心肌细胞损伤的干预作用及其机制初探

摘要

[目的]：
　　观察IGF-1(insulin like growth factor-1，IGF-1)在高糖状态下H9c2心肌细胞ROS生成及相关酶活性中的调节作用，为阐明IGF-1在心肌细胞能量转换中的作用机制提供线索。
　　[方法]：
　　1.采用比色法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量。
　　2.采用DCFDA(2'，7'-dichlorofluorescin diacetate)荧光探针检测各组细胞内活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)浓度，吸收光及激发光波长分别是495nm、529nm。
　　3.采用JC-1荧光探针检测各组细胞线粒体膜电位，采用透射电镜观察各组细胞线粒体形态改变。
　　4.通过Western blot检测各组细胞CYP1A1基因表达。
　　[结果]：
　　1.高糖诱导H9c2心肌细胞LDH活性升高及ROS、MDA生成增多，SOD活性降低。
　　2.IGF-1降低高糖诱导下H9c2心肌细胞内LDH酶活性及减少ROS、MDA生成，提升细胞内SOD活性。
　　3.IGF-1可以改善高糖状态下H9c2心肌细胞的线粒体功能。
　　4.IGF-1可以下调高糖状态下H9c2心肌细胞CYP1A1基因表达。
　　[结论]：
　　1.高糖可以诱导H9c2心肌细胞ROS及MDA生成增多。同样高糖培养条件下，H9c2心肌细胞内LDH酶活性增加，而SOD酶活性则降低。
　　2.IGF-1可以降低高糖培养下H9c2心肌细胞内ROS及MDA的生成。同等培养条件下，IGF-1还可以抑制H9c2心肌细胞内LDH酶活性、提升SOD酶活性。
　　3.IGF-1可以通过下调CYP1A1基因表达，从而保护H9c2心肌细胞线粒体功能免遭细胞内ROS损伤。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1 研究背景

1．2 研究目的

1．3 研究内容

2 高糖条件对H9c2细胞氧自由基生成的影响

2．1 材料与方法

2．2 结果

2．3 讨论

3 IGF-1对高糖诱导的H9c2心肌细胞的干预作用

3．1 材料与方法

3．2 结果

3．3 讨论

4 IGF-1对高糖诱导的H9c2心肌细胞线粒体的保护作用

4．1 材料与方法

4．2 结果

4．3 讨论

5 IGF-1调控高糖诱导的H9c2心肌细胞细胞色素P450基因表达

5．1 材料与方法

5．2 实验结果

5．3 讨论

6 小结

参考文献

综述 线粒体活性氧簇及其对心血管系统影响的研究进展

致谢

附录一 缩写词中英文对照

附录二 在读硕士期间所发表的论文

附录三 在读硕士期间所参与的课题