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柑橘属植物(Citrus L.)多甲氧基黄酮含量检测、单体纯化及其抗疲劳机理研究

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第1章 文献综述

1.1柑橘多甲氧基黄酮研究概况

1.1.1柑橘资源

1.1.2 多甲氧基黄酮

1.2多甲氧基黄酮的提取方法

1.3多甲氧基黄酮的检测技术

1.4多甲氧基黄酮的分离纯化

1.5多甲氧基黄酮单体(橘皮素)的生物活性研究

1.5.1抗氧化活性

1.5.2抗炎活性

1.5.3抗癌活性

1.5.4调解代谢综合症

1.5.5脑保护作用

1.6疲劳及其发生机制

1.6.1疲劳的概念与分类

1.6.2疲劳的发生机制

1.7类黄酮抗疲劳研究

第2章 引言

2.1研究目的与意义

2.2研究内容

2.2.1我国十三种地方特有柑橘品种多甲氧基黄酮组分与含量的检测分析

2.2.2大红袍红橘果皮多甲氧基黄酮单体的分离纯化与鉴定

2.2.3大红袍红橘多甲氧基黄酮抗疲劳体外单体筛选及其体内药效学验证

2.3技术路线

第3章 我国十三种地方特有柑橘品种多甲氧基黄酮组分与含量的检测分析

3.1研究材料

3.1.1 实验材料

3.1.2 实验主要药品与试剂

3.1.3 实验仪器

3.2研究方法

3.2.1标准品溶液的制备

3.2.2类黄酮测定方法的方法学验证

3.2.3样品的预处理

3.2.4样品类黄酮的提取

3.2.5色谱条件

3.2.6统计分析

3.3实验结果

3.3.1 UPLC-PDA方法学验证

3.3.2 十三种柑橘材料果皮中多甲氧基黄酮的组分

3.3.3 十三种柑橘材料果皮中多甲氧基黄酮的含量

3.3.4品种间多甲氧基黄酮的相关性分析以及主成分分析

3.4 讨论

3.4.1 柑橘属基本类型间多甲氧基黄酮组分与含量的分析

3.4.2 同一类型不同品种间多甲氧基黄酮组分与含量的分析

3.4.3 柑橘属植物多甲氧基黄酮资源的利用

3.5本章小结

第4章 大红袍红橘果皮多甲氧基黄酮单体的分离纯化与鉴定

4.1研究材料

4.1.1 柑橘材料

4.1.2 实验试剂

4.1.3 实验仪器

4.2研究方法

4.2.1大红袍红橘果皮多甲氧基黄酮的提取

4.2.2大红袍红橘果皮多甲氧基黄酮的富集纯化

4.2.3多甲氧基黄酮单体的分离制备

4.2.4多甲氧基黄酮单体的鉴定

4.2.5统计分析

4.3实验结果

4.3.1 大孔树脂的筛选

4.3.2 HPD100型大孔树脂对多甲氧基黄酮的静态吸附和解吸分析

4.3.3 HPD100型大孔树脂对多甲氧基黄酮的吸附热力学分析

4.3.4 HPD100型大孔树脂的动态吸附与解吸附

4.3.5 HPD100型大孔树脂纯化后粗提物中多甲氧基黄酮的组分及含量变化

4.3.6分离纯化结果及其单体鉴定

4.4讨论

4.4.1 大孔树脂对多甲氧基黄酮的吸附与除杂

4.4.2柑橘果皮多甲氧基黄酮单体的制备与鉴定

4.5本章小结

第5章 大红袍红橘多甲氧基黄酮抗疲劳体外单体筛选及其体内药效学验证

5.1研究材料

5.1.1 实验细胞与动物

5.1.2 实验药品与试剂

5.1.3 实验仪器

5.2研究方法

5.2.1细胞实验

5.2.2细胞活力检测

5.2.3实时荧光定量Real-time PCR

5.2.4免疫印记Western Bloting

5.2.5动物实验

5.2.6血乳酸检测

5.2.7肌肉糖原检测

5.2.8腓肠肌透射电镜

5.2.9免疫组化

5.2.10 数据分析

5.3实验结果

5.3.1 C2C12细胞分化结果及其鉴定

5.3.2 五种多甲氧基黄酮对C2C12肌管细胞活性的影响

5.3.3 五种多甲氧基黄酮对C2C12肌管细胞线粒体新生的影响

5.3.4橘皮素提高C2C12肌管细胞线粒体新生通路相关基因的表达

5.3.5橘皮素激活AMPK启动线粒体新生通路的发生

5.3.6橘皮素通过能量调节途径影响AMPK的活化

5.3.7橘皮素激活AMPK-PGC1-α-NRF1-TFAM 信号轴增加C2C12肌管细胞线粒体生物发生

5.3.8 橘皮素改善小鼠身体表现延迟疲劳发生

5.3.9 橘皮素减少小鼠血乳酸的水平增加肌肉糖原的储备

5.3.10橘皮素改善小鼠腓肠肌线粒体数量与体积

5.3.11橘皮素激活小鼠腓肠肌AMPK-PGC1-α-NRF1-TFAM信号通路

5.4讨论

5.5本章小结

第6章 总结与展望

6.1 本研究结论

6.2研究创新

6.3思考与展望

参考文献

附录

致谢

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