大鼠海马与吗啡依赖记忆相关差异表达基因cDNA的克隆、鉴定及应用研究

摘要

药物成瘾包括身体依赖和精神依赖两个方面.精神依赖的形成是一种特殊的恶性学习记忆过程,学习记忆在药物成瘾中居于重要的中心环节,这是当前国际成瘾医学领域的一个全新认识.能否通过阻断反复用药造成的长期记忆来减轻或消除患者的精神依赖,防止复吸是药物成瘾防治中一个崭新的研究领域.该课题的研究方向是:在基因水平探索阻断与药物成瘾有关的学习记忆过程,为有效地防止复吸提供实验依据.筛选及鉴定与药物成瘾记忆相关的目的基因是研究的第一步,也是该课题的主要内容.由于基因表达的改变是药物成瘾时中枢神经元发生相对稳定的功能改变导致长时程行为可塑性变化的主要分子机制,也是药物成瘾相关记忆形成的基础,因此采用基因差异表达分析技术,检测正常及吗啡依赖大鼠与成瘾记忆密切相关的组织之间基因表达的差异是寻找有意义目的基因的有效途径.该课题首先建立吗啡依赖形成条件性位置偏爱大鼠动物模型;采用抑制消减杂交技术构建正常与吗啡依赖形成条件性位置偏爱大鼠海马组织mRNA的抑制消减cDNA文库;应用反向Northern杂交筛选差异表达基因;使用原位杂交技术观察相关基因的细胞定位及表达后,采用反义核酸技术封闭靶细胞目的基因的表达,观察吗啡依赖大鼠条件性位置偏爱行为的变化,同时对差异表达基因的功能进行鉴定,为基因治疗药物成瘾提供实验资料.

目录

文摘

英文文摘

英文缩写一览表

前言

第一部分吗啡依赖形成条件性位置偏爱大鼠动物模型的建立

材料与方法

结果

讨论

小结

第二部分大鼠海马与吗啡依赖记忆相关差异表达基因cDNA文库的构建和筛选

材料与方法

一、主要实验设备

二、主要试剂与药品

四、生物信息学分析

结果

讨论

小结

第三部分大鼠与吗啡依赖记忆相关差异表达基因mRNA在海马及毗邻脑区的表达

材料与方法

结果

讨论

小结

第四部分差异表达基因的反义核酸应用研究

材料与方法

结果

讨论

小结

照片

参考文献

文献综述一阿片成瘾记忆的分子机制研究进展

参考文献

文献综述二药物成瘾的基因组学研究进展

参考文献

致谢

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