一例慢性乙型肝炎重型化患者血清HBV准种的动力学研究

摘要

慢性乙型肝炎是否发病及发病的严重程度与病毒因素和宿主因素的共同作用有关.目前普遍认为慢性乙型肝炎患者的肝细胞损害是免疫介导的.乙型肝炎核心抗原(HBcAg)由HBV C基因编码,是免疫攻击的靶抗原,细胞毒性T淋巴细胞(CTL)可促使表达靶抗原的感染肝细胞死亡.C基因转录调控区存在于前C基因上游的基本核心启动子(basal core promoter,BCP)内,该区突变可直接对C基因的转录及基因编码产物的表达产生影响.前C基因的热点突变ntG1896A突变(A83突变)可导致原有的由TGG编码的色氨酸转换为终止密码子(TAG),从翻译水平造成HBeAg合成中断.由于CTL在免疫识别上并不能区分HBcAg和HBeAg,因此HBeAg可以缓和CTL对感染肝细胞的免疫攻击.为了初步探讨HBV前C/C基因及C启动子区准种与宿主肝病活动间的关系,该研究选择了1例慢性乙型肝炎患者初次发病时、好转时、发生重型肝炎时、重型肝炎好转后2月、4月的共5份血清样本进行研究,采用PCR-T载体克隆-CSGE变异检测-核酸序列分析的实验流程,PCR扩增和克隆了以上血清样本的HBV前C/C基因及BCP-ORF区片段,并从每份样本的克隆产物中随机选出33个克隆进行CSGE检测,对CSGE筛选出的不同克隆进行序列分析,展示了该慢性乙型肝炎患者血清HBV准种随肝病活动的动态变化,初步探讨了HBV前C/C基因及C启动子区准种随宿主肝病活动的互动关系.结论:1.慢性乙型肝炎患者血清HBV前C/C基因及BCP区存在准种现象,且该区准种随宿主病程进展可发生动态变化,患者慢性乙型肝炎及重型肝炎发病时该区准种复杂性及异质性低,而病情好转后该区准种复杂性及异质性升高,且随时间的累积不断上升.2.慢性乙型肝炎患者血清HBV前C/C基因及BCP区准种的优势株和弱势株可随病情变化而相互消长.3.慢性乙型肝炎患者血清HBV前C/C基因及BCP区准种可随患者病情演变而发生漂变.4.G1896A、cP5T、cL60V和cS155T突变可能与宿主慢性乙型肝炎及重型肝炎发病有关,A1762T/G1764A突变可能与慢性乙型肝炎患者肝病发作无关.

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参考文献

文献综述 乙型肝炎病毒准种研究进展

参考文献

攻读硕士学位期间撰写的文章