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MabO3.2C1C2体外保护作用的研究和在实验动物检测中的应用

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第一部分单抗Mab03.2C1C2影响白念珠菌芽管形成及粘附作用的实验研究

材料与方法

结 果

讨论

第二部分单抗Mab03.2C1C2在系统性白念珠菌感染动物模型早期诊断中的应用

材料与方法

结 果

讨论

全文总结

致 谢

参考文献

文献综述一深部念珠菌病诊断的研究进展

文献综述二常见致病性真菌发病机制的研究进展

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摘要

目的:在我科已制备出一株抗白念珠菌芽管胞壁外膜抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株03.2C1C2基础上,初步探讨单抗Mab03.2C1C2在体外抑制白念珠菌相变以及在单抗Mab03.2C1C2参与下白念珠菌对上皮细胞和内皮细胞的粘附作用,和在系统性白念珠菌感染动物模型中的实验室检测应用。 方法:制备Mab03.2C1C2腹水单抗并纯化之。将不同浓度的Mab03.2C1C2分别与白念珠菌孢子悬液,白念珠菌孢子和人口腔粘膜上皮细胞混合液,白念珠菌孢子和胎儿脐静脉内皮细胞混合液共同孵育,观察Mab03.2C1C2对白念珠菌芽管生成的抑制作用以及Mab03.2C1C2影响白念珠菌对上皮细胞、内皮细胞粘附作用;建立系统性白念珠菌感染兔模型,用双抗体夹心ELISA法检测动物血清标本中的芽管特异性抗原。 结果:Mab03.2C1C2能显著降低白念珠菌芽管生成率,和在芽管形成条件下白念珠菌对上皮细胞、内皮细胞的粘附,其抑制作用与该单抗的浓度成正比;用ELISA法检测了20只兔模型70份血清标本中芽管特异性抗原,敏感性为61.4%(43/70),特异性为90%,并且50%的兔在接种后24h后就可在血液标本中检出芽管抗原。健康对照兔血清中检出2例阳性血清,假阳性率为10%(2/20)。临床标本:健康对照组及口腔粘膜念珠菌病组未检出抗原,特异性为100%。系统性白念珠菌感染和痰培养为白念珠菌组患者7份血清中有3份为阳性结果,4份阴性。阳性率为42.9%,与健康对照组和口腔粘膜念珠菌病组比较,有显著的差异性。 结论:Mab03.2C1C2在体外能抑制白念珠菌芽管的形成,通过抑制白念珠菌芽管的形成而抑制白念珠菌对人口腔颊粘膜上皮细胞、胎儿脐静脉内皮细胞的粘附,降低白念珠菌的侵袭力;ELISA法检测系统性白念珠菌感染血清芽管特异性抗原特异性强,尽管存在一些不足,ELISA法检测血清芽管特异性抗原仍是一种快速、简便检测方法,对个体来说,连续多次抽血检测可以提高检出率,有助于系统性白念珠菌感染的早期诊断。

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