低氧应激肽在创伤后的表达和谱学特征的研究

摘要

本课题研究了临床上颅脑外伤患者创伤后早期血清HSP的表达规律，对家兔胆管受到不同程度钳夹损伤后的HSP表达情况进行动态观测，探讨创伤后人体和动物HSP表达的影响因素及其意义，为HSP在临床上创伤的诊断、治疗和预后方面的应用提供实验依据。 方法：收集病人颅脑外伤后48小时内血清，冻存于-40℃待检。创伤组纳入标准：患者ISS≥16分，年龄≥18岁，病人创伤后存活超过一周，对照组为健康体检者；建立家兔胆管钳夹损伤模型，干预因素为钳夹力度(格数)和钳夹持续时间，共分14组，每组5只家兔，在胆管钳夹损伤后3d、7d、14d和30d采取家兔心脏血分离血清冻存于-40℃待检；采集健康人群急进高原3天、移居和世居人群的血清，同时收集平原人群血清作为对照。采用前期建立的HSP快检方法批量检测血清HSP含量，采用全自动生化分析仪检测生化指标，采用RIA检测血清皮质醇，采用紫外分光光度计、核磁共振仪对HSP纯品的紫外光谱和13C-NMR特征进行初步分析。 结果：1、与对照组相比较，颅脑创伤后人体血清低氧应激肽含量显著增高(HSP：101.8±22.4mg/L，N=48，p＜0.01)，皮质醇水平也显著增高(皮质醇：300±160ng/ml，N=48，p＜0.01)。颅脑创伤后早期HSP即有升高，24小时达高峰，以后逐渐降低。 2、与对照组相比较，家兔胆管受到不同程度钳夹损伤后HSP和TBIL、DBIL、ALT、AST、GGT均显著升高(p＜0.05)；家兔胆管受到钳夹力度越大，钳夹伤持续时间越长，HSP和肝功能指标的值越高。 3、健康人群急进高原第3天时机体血清HSP和心肌酶谱水平较平原对照组显著升高(p＜0.01)。移居高原一年后人体血清HSP维持较高水平(p＜0.05)，但与进藏3天时相比较显著下降(p＜0.01)。 4、HSP在波长204.88nm处有最大紫外光吸收，通过13C-NMR分析发现HSP分子中可能含有下列几种氨基酸：缬氨酸(Val)、异亮氨酸(Ile)、色氨酸(Trp)、苯丙氨酸(Phe)、酪氨酸(Tyr)、精氨酸(Arg)、赖氨酸(Lys)、脯氨酸(Pro)、苏氨酸(Thr)。 结论：1、颅脑创伤后早期人体血清HSP和皮质醇含量显著升高，HSP可以作为机体急性损伤时的应激反应标志物。 2、家兔胆管钳夹伤后血清HSP含量与钳夹力度和钳夹伤持续时间存在剂量效应关系，钳夹力度越大，钳夹持续时间越长，HSP含量和肝功能指标的值越高。通过监测家兔血清HSP和肝功能变化，可以客观反映家兔胆管损伤程度。 3、平原地区健康人群急进高原低氧环境初期，HSP应激性升高，同时心肌酶谱水平显著升高。移居高原一年以后，机体逐渐适应，HSP含量和心肌酶谱水平逐渐降低。HSP可保护机体细胞减轻低氧损伤。 4、HSP不仅可由低氧所诱导产生，还可由创伤等其他应激因子诱导合成。采用多技术手段明确了HSP的紫外吸收特性和部分分子结构信息，为深入研究HSP的结构和理化性质奠定了基础。

目录

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英文缩写一览表

前 言

第一部分颅脑外伤后早期低氧应激肽的表达

引言

1资料与方法

2结果

3讨论

第二部分家兔胆管钳夹伤后低氧应激肽的表达

引言

1材料与方法

2结果

3讨论

第三部分暴露高原不同时间人体血清低氧应激肽的变化

引言

1对象与方法

2结果

3讨论

第四部分低氧应激肽的紫外光谱和核磁共振波谱学研究

引言

1仪器、试剂和方法

2结果

3讨论

图 片

全文小结

参考文献

致 谢

文献综述 创伤后应激蛋白的效应表达与分子调节研究进展

附记