Long Evans鼠视皮层眼优势柱可塑性及其蛋白基础的实验研究

摘要

目的：建立不同的LongEvans鼠眼优势柱可塑性动物模型或眼优势柱可塑性终止动物模型，采用细胞外记录技术研究LongEvans鼠动物模型眼优势柱可塑性的变化，利用蛋白质组学技术比较、鉴定LongEvans鼠视皮层与眼优势柱可塑性相关或与眼优势柱可塑性终止相关的蛋白质，探讨视皮层可塑性及其终止的蛋白机制，为儿童眼病治疗及成年后视功能损伤病人的康复提供理论基础。 方法：本研究主要分为三个部分，各部分的具体研究方法如下：1、建立眼优势柱检测技术(SINGLEUNITRECORDING)；检测成、幼年LONGEVANS鼠视皮层眼优势柱可塑性的变化。2、幼年LONGEVANS鼠视皮层内微灌注放线菌酮抑制视皮层内蛋白生成，建立幼年LONGEVANS鼠眼优势柱不移动的动物模型，眼优势柱检测技术检测动物模型是否成功；蛋白质组学技术分离、鉴定与眼优势柱可塑性相关的蛋白质。3、降解成年LONGEVANS大鼠视皮层内硫酸软骨素，建立成年LONGEVANS鼠眼优势柱移动动物模型，眼优势柱检测技术检测动物模型是否成功；蛋白质组学技术分离、鉴定与眼优势柱可塑性终止相关的蛋白质。 结果：1、成功建立了眼优势柱检测技术。证实单眼剥夺能导致幼年LongEvans大鼠视皮层眼优势柱漂移，而不能导致成年LongEvans大鼠视皮层眼优势柱漂移。2、向视皮层内微灌注放线菌酮抑制蛋白生成后，单眼剥夺不能引起幼年LongEvans大鼠视皮层眼优势柱的漂移。3、蛋白质组学技术分离、鉴定出多种代谢酶和septin4与幼年LongEvans大鼠视皮层眼优势柱可塑性有关。4、成年LongEvans大鼠视皮层内硫酸软骨素降解后，单眼剥夺又能引起成年LongEvans大鼠视皮层眼优势柱的漂移。5、蛋白质组学技术分离、鉴定出磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PhosphatidylethanolaminebindingProtein)和胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein，GFAP)与成年LongEvans大鼠视皮层眼优势柱的终止过程相关。 结论：1、幼年LongEvans大鼠视皮层眼优势柱具有可塑性，成年LongEvans大鼠视皮层眼优势柱可塑性终止。2、幼年LongEvans大鼠视皮层眼优势柱移动过程中需要合成新的蛋白质。3、多种代谢酶和septin4参与了视皮层眼优势柱可塑性过程。4、成年LongEvans大鼠视皮层内的硫酸软骨素抑制了眼优势柱可塑性。5、磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PhosphatidylethanolaminebindingProtein)和胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein，GFAP)参与了成年LongEvans大鼠视皮层眼优势柱的终止过程。

目录

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英文缩写简表

摘要

前 言

第一部分Long Evans鼠初级视皮层眼优势柱可塑性的发育性变化

材料和方法

结 果

讨 论

小 结

第二部分幼年Long Evans鼠初级视皮层眼优势柱可塑性的蛋白基础

材料和方法

结 果

讨论

小 结

第三部分成年Long Evans鼠初级视皮层眼优势柱可塑性终止的蛋白基础

材料和方法

结 果

一硫酸软骨素酶微注射联合单眼剥夺后成年鼠眼优势柱的分布

二人工脑脊液微注射联合单眼剥夺后成年鼠眼优势柱的分布

三硫酸软骨毒酶微注射动物模型

四双向电泳胶图蛋白质点差异分析

五差异蛋白质点MALDI-TOF-MS肽质量指纹谱分析

六视皮层胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫组化染色

讨论

小 结

全文结论

致 谢

参考文献

文献综述一视皮层眼优势柱可塑性的分子基础

文献综述二蛋白质组学研究的现状和方法

前言

一蛋白质组学的含义

二蛋白质组学研究现状

三蛋白质组学研究方法

四蛋白质组学发展趋势

参考文献

附博士阶段以第一作者发表论文