复方奥硝唑甲磺酸培氟沙星缓释牙栓的研制及质量评价

摘要

背景： 牙周病是牙齿支持组织发生的感染性疾病，急性期可引起牙龈肿痛，慢性牙周炎病程迁延，进行性发展，久之可能导致牙齿的丧失。据世界卫生组织对35个国家的统计资料，牙周炎发病率大多在40％～75％之间。它不仅影响到患者的发音、美观、咀嚼及消化功能，而且与机体的全身健康有关，可能是某些系统性疾病的危险因子。龈下菌斑的形成是导致牙周病重要的始动因素，而其中的细菌是必不可少的致病源。因此，抗菌药物治疗是牙周病治疗的重要手段之一。全身使用抗菌药物，能抑制侵入牙周组织或口腔其他部位(如扁桃体、舌背等处)的潜在致病菌。但即使全身大剂量使用药物，药物仍大多集中于血清，要求反复给药，可能出现口腔菌群失调，毒副作用增加，依从性较差等不良影响。为克服上述问题，国内外学者提出了局部抗菌药物治疗牙周病的方案。局部用药能在减少用药剂量的同时提高病变部位有效药物浓度，可以达到全身治疗药物浓度的10～100倍，降低毒副作用、耐药性的发生几率，依从性更好。其中，局部使用缓(控)释制剂优越性更为突出，具有用药剂量小，药效持续时间长，给药次数少，有利于降低药物毒副作用，避免出现血药浓度峰谷现象的优点。目前龈下给药装置多以纤维、粉末、药条、糊剂、凝胶或软膏等形式。 目的： 本研究拟自行设计适用于不同牙位、不同深度牙周袋的牙栓模具，以奥硝唑、甲磺酸培氟沙星为主药，以适宜的辅料为基质制备复方缓释牙栓。采用紫外分光光度法建立质量控制标准，以此为基础进行体外释药实验考察其释药特性。通过体外抑菌实验检测其体外抑菌活性，为进一步动物、临床试验奠定基础。 材料及方法： 1.根据前、后牙牙周袋不同的解剖外形，以及临床应用的可行性、适用性，选择恰当的模具材料，设计并制作适应不同牙位、不同深度牙周袋需要的牙栓模具。 2.通过对明胶甘油基质、不同分子量聚乙二醇、泊洛沙姆、HPMC、EC、CMC-Na、壳聚糖等多种辅料，及热熔法、冷压法等制备工艺的筛选，以牙栓外观、硬度、韧性、便于临床操作及实验室制备为考察指标，确定该复方缓释牙栓的基质组成及制备方法。制备工艺如下：采用冷压法制备。以95％乙醇充分溶胀EC后，加入适量纯化水、甘油及处方量甲磺酸培氟沙星及奥硝唑，混合均匀，添加HPMC，搅拌，乙醇挥发，待基质溶胀至可搓条成型时，取适量压入模孔，启模，自然凉干即可。 3.选用牙龈卟啉单胞菌(ATCC33277)、具核梭杆菌(ATCC10953)、中间普氏菌(ATCC25261)、消化链球菌(ATCC27337)、变形链球菌(ATCC25175)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)及表皮葡萄球菌(ATCC14990)为实验菌株，采用琼脂纸片扩散法(K-B法)，对5种不同药物浓度(1％、2％、5％、10％、20％)的复方缓释牙栓进行体外抑菌实验，根据抑菌圈大小判定细菌对不同浓度牙栓的敏感性，确定牙栓较适宜的含药量。 4.采用紫外分光光度法，以纯化水为溶媒，利用紫外光叠加原理，建立甲磺酸培氟沙星及奥硝唑回归方程，分别检测其线性范围及回收率大小，以此制定该制剂的质量控制标准。 5分别随机抽取6个备选处方的5粒牙栓，以5ml去空气纯化水为释放介质，在37°C恒温条件下，于2、3、4、5、6、8、10、12h时间点定时取样500μl，同时补充释放介质500μl。取出的样品液置于50ml容量瓶内，纯化水稀释定容至刻度。使用紫外分光光度法，在测定波长处测定其吸光度值，根据回归方程计算其浓度及累积百分含量。以此为考察指标，筛选出较为适宜的处方比例，使所制牙栓达到较理想的缓释效果。 结果： 1.所制牙栓模具为不锈钢质地，前牙模孔尺寸：长3～4mm，宽2mm，厚350μm～500μm，锥度约40°；后牙模孔尺寸：长3～4mm，宽4mm，厚350μm～500μm，锥度约55°。均呈扁梭形，边缘圆钝。 2.通过制备工艺及栓剂基质的筛选，结果显示以HPMC、EC为基质，采用冷压法适于该牙栓制备。所制牙栓为扁梭形淡黄色或白色小体，表面光滑细腻，硬度适宜、有良好的弹性韧性，不黏附模具、牙科镊，不易折断变形，便于临床医师操作。 3.5种不同药物浓度的复方奥硝唑甲磺酸培氟沙星缓释牙栓对7种主要牙周致病菌均有一定的抑菌作用。7种不同菌株之间的抑菌环大小不同，5种不同浓度牙栓之间的抑菌环大小也不同。就菌株而言此复方牙栓对金黄色葡萄球菌作用最强，对变形链球菌的抑菌效果较差。20％给药浓度的复方缓释牙栓抑菌环直径均大于其它4种给药浓度牙栓的抑菌环直径。 4.该复方缓释牙栓平均粒重9.48mg，最大粒重差异5.06％(＜10％)。 奥硝唑回归方程为0.0856A318-0.0258A275=0.004106C奥硝唑-0.00426136，回收率为99.4％；甲磺酸培氟沙星回归方程为0.05241A275-0.01474A318=0.004106C甲磺酸培氟沙-0.00321360,回收率为98.4％。 5.该制剂以有效药物浓度持续释放超过12h，3h时释放40％左右，8h时释放85％左右。筛选出的处方如下： EC350mg，HPMC350mg，奥硝唑40mg，甲磺酸培氟沙星60mg，95％乙醇，甘油及纯化水适量，共1000mg，约制100粒。 结论： 1.该牙栓制备工艺简单，粒差小，符合2005年版《中国药典》对栓剂的规定。多个尺寸的设计能基本满足不同牙周袋给药需要。 2.不同含药量的牙栓在体外环境中对这7种牙周常见致病菌均有较强的抗菌活性，本制剂所选用的10％含药量的牙栓能达到较好的抑菌效果。 3.质量控制采用紫外分光光度法，不经分离直接测定，方法简单可靠。 4.体外释药试验表明该缓释牙栓在体外环境下，能以有效药物浓度持续释药超过12h以上，无突释现象，且释放完全。符合2005年版《中国药典》对局部缓释制剂的要求。

目录

第三军医大学研究生学位论文独创性声明及第三军医大学研究生学位论文版权使用授权书

英文缩写及中英文对照表

摘要

前言

第一部分复方奥硝唑甲磺酸培氟沙星缓释牙栓的研制及体外抑菌实验

第二部分复方奥硝唑甲磺酸培氟沙星缓释牙栓的质量评价及体外释药实验

全文小结

致谢

照片

参考文献

文献综述局部抗菌药物治疗牙周疾病进展

研究生期间发表文章