P1-修饰微乳液相色谱高通量测定药物亲脂性的研究

摘要

目的：在本研究中，将P1和微乳结合作为流动相，使在流动相和固定相上引入P1分子，建立新的生物分配高效液相色谱，用于高通量筛选药物亲脂性和模拟药物与生物膜的相互作用。本研究建立的P1修饰微乳液相色谱利用logk建立模型预测logP（正辛醇/水分配系数的对数，用于描述化合物亲脂性），并且应用于电离和不电离药物亲脂性研究中。除了药物亲脂性，本研究还将利用P1修饰微乳液相色谱模拟药物通过血脑屏障的过程，利用logk建立模型预测logBB。
　　方法：1.P1用量和表面活性剂类型的确定
　　通过测定不同P1含量的P1修饰微乳溶液的相对粘度（25℃）和紫外吸收，选择相对粘度小的且P1含量多的体系，并且紫外吸收要弱，这样才符合液相色谱流动相的要求。
　　2.引入P1的微乳组成的筛选
　　在引入P1前，要得到最佳的微乳组成。配制多种不同组成的微乳液相色谱流动相，通过logk-logP的相关性分析，选择相关性大的微乳组成作为用于引入P1的条件。
　　3.P1修饰微乳液相色谱的建立
　　将P1引入最佳微乳条件，初步建立P1修饰微乳液相色谱。考察此色谱体系的稳定性和重现性。通过线性溶剂化方程描述分析物分子与色谱体系间的相互作用，用欧氏距离和主成分分析评价此色谱体系，并与文献报道的体系比较预测logP的能力。
　　4.P1修饰微乳液相色谱预测logP模型的建立
　　在P1修饰微乳液相色谱体系条件下，建立logk-logP模型，并引入分子结构参数，提高模型预测logP的能力。
　　5.P1修饰微乳液相色谱的优化
　　在初步获得的P1修饰微乳液相色谱条件下，对其进行优化，并制备P1修饰微乳柱系统。通过logk-logP相关性分析评价优化的结果。
　　6.电离和不电离分析物在P1修饰微乳液相色谱的应用
　　将优化后得到的P1修饰微乳液相色谱体系应用于电离和不电离分析物，建立预测药物亲脂性模型。比较logk-logP与logk-logD的相关性结果，并通过logk值的主成分分析将本研究所得体系与文献报道体系进行比较。
　　7.P1修饰微乳液相色谱预测logBB模型的建立
　　在最佳P1修饰微乳液相色谱体系下，建立logk-logBB模型，并引入分子结构参数，提高模型预测logBB的能力。
　　结果和结论：通过确定P1用量、表面活性剂类型和筛选微乳组成实验和数据分析，初步建立P1修饰微乳液相色谱系统（流动相组成为0.08％ P1-3.0%SDS-6.0%正丁醇-0.8%乙酸乙酯-90.2%水），并获得好的稳定性和重现性。线性溶剂化方程指出溶质体积和氢键碱度对分析物保留影响最大。通过欧氏距离和主成分分析证明此体系与正辛醇/水体系性质相似，可用于预测logP。建立logk-logP模型（R2=0.797），但通过逐步回归引入了摩尔体积（MV）参数至模型后，使得模型的预测能力有明显的提高(logP=2.168logkMP12+0.003MV+1.551,R2=0.856)。将初步获得的P1修饰微乳液相色谱流动相优化后，获得最佳流动相组成为0.2%P1-3.0%SDS-6.0%正丁醇-0.8%乙酸乙酯-90.0%水。P1修饰微乳柱色谱的logk-logP线性关系较差，预测logP能力弱。将优化后得到的P1修饰微乳液相色谱体系应用于电离和不电离分析物，比较发现logk-logD的相关性（logD7.0=2.030logkMP9+1.796,R2=0.673）比logk-logP好。通过与其他文献体系比较，P1修饰微乳液相色谱体系有好的预测logD能力。在最佳P1修饰微乳液相色谱体系下，建立logk-logBB模型，发现logk与logBB没有明显的线性关系，但将摩尔分子量（MW）大于250的药物剔除后，logk-logBB线性关系有明显的提高（R2=0.612），且在此基础上引入参数（MW），能获得好的预测logBB模型（logBB=0.347logk-0.002MW+0.352, R2=0.793）。

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序言

1. 药物亲脂性概述

1.1 药物亲脂性的研究意义

1.2 测定药物亲脂性的方法（logP/logD）

1.3 测定药物血脑屏障分配系数的方法（logBB）

2 生物分配色谱

2.1 胶束和微乳色谱

2.2 脂质体色谱

2.3 固定化人工膜色谱

3 立题目的

第一章 P1修饰微乳液相色谱流动相体系的制备与考察

1 仪器与试药

1.1 仪器

1.2 药品与试剂

2 实验方法

2.1微乳溶液的配制

2.2 微乳溶液粘度的测定

2.3 C18固相萃取柱预实验

3 结果与讨论

3.1 微乳中P1含量的确定

3.2 表面活性剂的选择

3.3 检测波长的选择

3.4 P1修饰微乳吸附和洗脱性能的考察

4 小结

第二章 P1修饰微乳液相色谱法预测药物亲脂性logP

1 仪器与试药

1.1 仪器

1.2 药品与试剂

2 实验方法

2.1 溶液的配制

2.2 色谱条件

2.3 计算公式

2.4 数据来源

3 结果与讨论

3.1 SDS微乳体系的优化

3.2P1修饰微乳液相色谱的建立

3.3 P1修饰微乳液相色谱模型对药物亲脂性的预测

4 小结

第三章 优化P1修饰微乳液相色谱法和预测logBB

1 仪器与试药

1.1 仪器

1.2 药品与试剂

2 实验方法

2.1 溶液的配制

2.2 色谱条件

2.3 P1微乳修饰柱体系

2.4 数据来源

3 结果与讨论

3.1 P1修饰微乳液相色谱体系的优化

3.2 logk与logP和logD的关系

3.3 MP9体系与各体系logk的比较

3.4预测logBB模型的建立

4 小结

全文结论

参考文献

攻读学位期间发表的论文