狼紫草抗体表溃疡作用及其机制研究

摘要

体表溃疡是一种常见的难治性疾病，其主要病因包括创伤、局部血液循环障碍、感染等，其共同特征是创面经久不愈，病程反复。随着人民生活水平的提高，老龄人口的增多，糖尿病性溃疡和下肢静脉性溃疡的发生也呈上升趋势。溃疡不仅从肉体和精神上给患者带来了痛苦，也给社会和家庭带来了沉重的经济负担。在体表溃疡的发生与愈合过程中，炎症自始至终发挥着重要的作用，不仅造成溃疡局部的损伤迁延，更影响溃疡的恢复。然而，目前常用的的抗炎抗菌药物并不能有效解决溃疡炎症过程中细胞因子表达紊乱状况，疗效十分有限。狼紫草(LycopsisorientalisLinn)是一种紫草科一年生或越年生植物，在我国民间用于治疗疮肿历史悠久，效果良好。但长久以来，国内外尚缺乏有关药效及其机制方面的系统研究。为此，本研究在成功制备狼紫草有效提取物的基础上，采用多种炎症与疼痛动物模型，从多个水平对其抗皮肤溃疡作用及其机制进行了研究，旨在为寻找新型抗体表溃疡药物及狼紫草的进一步开发应用提供实验资料和理论依据。 方法： 采用煎煮法制备狼紫草水提物(aqueousextractsfromlycopsisorientalislinn，AELO)。醋酸化学刺激法制作小鼠体表溃疡模型，观察AELO对溃疡愈合的影响；分光光度法测定溃疡组织中PGE2含量；ELISA法测量小鼠血清中IL-1β，IL-6以及TNF-α等细胞因子水平。通过小鼠急性腹膜炎模型，利用分光光度法检测毛细血管通透性。通过小鼠醋酸扭体实验及热板实验，测定AELO对小鼠痛阈的影响。分别采用Westernblotting和RT-PCR法测定局部皮肤溃疡组织中环氧酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)蛋白及其mRNA表达情况。利用平板打孔法和纸片法测定狼紫草水提物抑菌效价和菌株对其的敏感性试验。 结果： 1.局部应用狼紫草3天及5天后，小鼠皮肤溃疡愈合程度评分明显提高，尤以第5天最为明显。局部应用AELO3～7天后，小鼠溃疡组织中PGE2含量明显降低；与对照组相比，第3、5、7天分别减少57.6％、66.4％、46.1％。 2.在小鼠热板实验及扭体实验中，狼紫草治疗组(10～40g/kg)小鼠痛阈时间明显延长，扭体反应次数均明显减少。在小鼠急性腹膜炎实验中，模型组小鼠腹腔有大量伊文思蓝渗出，明显高于正常组；狼紫草各剂量治疗组中伊文思蓝渗出均明显下降，尤以狼紫草高剂量治疗组最为明显。 3.小鼠急性腹膜炎模型建立后6小时，血清中IL-1β，IL-6以及TNF-α水平显著升高，应用AELO(10～40g/kg)处理后，IL-1β，IL-6和TNF-α浓度均显著降低(p＜0.05)，且降低程度与AELO剂量呈显著正相关。 4.正常小鼠皮肤组织中几乎无COX-2表达，模型组小鼠体表溃疡组织中COX-2mRNA及其蛋白的表达均显著增加，应用AELO治疗后，二者表达水平明显降低。 5.平板打孔法测定抑菌效价与纸片法药液敏感性试验表明，狼紫草水提物对大肠埃希氏菌，金黄色葡萄球菌以及粪肠球菌均有明显的抑制作用；而对乙型溶血性链球菌无抑制作用。 结论： 1.狼紫草水提物能明显促进小鼠皮肤溃疡组织的愈合。 2.狼紫草水提物具有显著的镇痛作用，能有效降低炎症时毛细血管通透性，减少IL-1β，IL-6以及TNF-α等细胞因子的生成，下调溃疡组织中COX-2及其mRNA的表达，减少PGE2的生成。 3.狼紫草水提物对大肠埃希氏菌，金黄色葡萄球菌以及粪肠球菌具有良好的体外抑制作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词对照表

声明

前言

第一部分 狼紫草水提物抗体表溃疡与抗炎镇痛作用研究

材料与方法

结果

讨论

小结

第二部分 狼紫草抗炎及镇痛作用机制研究

材料与方法

结果

讨论

小结

第三部分 狼紫草抗菌作用的研究

材料与方法

结果

讨论

小结

全文结论

致谢

参考文献

文献综述 紫草科植物的药理作用与应用研究进展

研究生阶段发表的论文