青蒿琥酯对啮齿类CLP模型动物的保护作用

摘要

目的： 脓毒症(sepsis)是由感染因素介导的全身性炎症反应综合征(Systemic inflammatoryresponse syndrome，SIRS)，是严重创伤、外科大手术后常见的并发症，由脓毒症进展所导致的休克和多器官功能障碍综合征(mutiple organ dysfunction syndrome，MODS)是导致临床危重患者死亡的重要原因，其病死率高达50％-60％，至今尚无可靠有效的治疗手段。因此寻找防治脓毒症的药物具有重要意义。 盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture，CLP)模型是经典的脓毒症模型。本研究拟在对啮齿类CLP模型动物进行相关研究的基础上，探讨青蒿琥酯对啮齿类CLP模型动物的保护作用及机制，为脓毒症的防治和扩大青蒿琥酯类药物的临床适应症提供实验依据。 方法： 一、啮齿类动物CLP模型的建立：采用不同型号的穿刺针及对盲肠做不同的穿孔数量制作CLP动物模型，观察CLP动物7d的存活情况。 二、青蒿琥酯对啮齿类CLP模型动物的保护作用：CLP术后肌注给药和尾静脉给药，观察7d。 三、青蒿琥酯单用和联合舒氨西林对啮齿类CLP模型动物的保护作用。 四、青蒿琥酯对啮齿类CLP模型动物保护作用的机制研究： 1.动态观察青蒿琥酯对CLP模型小鼠血中细菌、LPS、TNF-α和IL-6水平的影响； 2.观察CLP模型小鼠术后12 h肺组织病理学的变化。 结果： 一、控制动物死亡率在90％左右的CLP模型制作条件为：大鼠用16号穿刺针穿孔2次；小鼠用12号穿刺针穿孔2次。 二、青蒿琥酯对啮齿类CLP模型动物的保护作用：在大鼠保护实验中青蒿琥酯联合舒氨西林用药动物存活率为48％，舒氨西林组为24％，青蒿琥酯组为28％；在小鼠保护实验中联合用药组存活率为40％，舒氨西林组为20％，青蒿琥酯组为28％。联合用药组动物存活率均高于单独用药组，具有显著的统计学差异。 三、青蒿琥酯对啮齿类CLP模型动物保护作用的机制研究： 1.青蒿琥酯联合舒氨西林对CLP模型动物血清LPS的影响：CLP术后0.5 h对照组动物血中即可检出LPS，其检出值在0.5-2 h缓慢升高，2h后急剧上升，在12 h达峰值，以后逐渐下降；联合用药组LPS的检出规律与对照组相似，但在各时相点的检出值均低于对照组，在24 h时具有显著统计学差异。 2.青蒿琥酯联合舒氨西林对CLP模型动物血清TNF-a的影响：CLP术后0.5 h对照组动物血中即可检出TNF-α，其检出量在0.5-8 h缓慢升高，8h后急剧上升，在12 h达峰值，以后逐渐下降。联合用药组动物在术后1h左右血中TNF-α开始升高，8 h以后逐渐下降，无明显峰值形成，其检出值在各时相点均低于对照组，在2h、4h、8h、12 h时相点具有显著统计学差异。 3.青蒿琥酯联合舒氨西林对CLP模型动物血清IL-6的影响：CLP术后0.5 h对照组动物血中即可检出IL-6，其检出量在0.5-1h缓慢升高，1h后急剧上升，在2-12 h间形成一平台峰，12 h后迅速下降，在24 h接近1h水平；其它各组动物血清IL-6的检出规律与对照组相似。联合用药组动物血清IL-6的检出值在各时相点均低于对照组动物，在2h、4h、12 h时相点具有显著统计学差异。 4.青蒿琥酯联合舒氨西林对CLP模型动物血中细菌检出的影响：CLP术后0.5 h对照组动物血中即可检出细菌，其检出的菌量在0.5-2 h缓慢升高，2h后急剧上升，在8-12h达峰值，以后逐渐下降；联合用药组动物在术后1.12 h血中检出细菌，在1-12h期间血中检出的细菌无峰值形成，其细菌的检出值在各时相点均显著低于对照组和青蒿琥酯组，在12 h、24 h血中检出细菌明显低于舒氨西林组。 5.肺组织病理检测： CLP术后动物肺组织损伤严重，表现为不同程度的肺泡扩张，肺泡腔内浆液渗出及炎性细胞浸润，肺泡隔断裂，间隔增宽、充血，细胞脱落等改变；青蒿琥酯联合舒氨西林在12 h时相点可明显减轻CLP模型小鼠肺组织的病理损伤，仅见少量充血，炎性细胞浸润和肺泡隔断裂。 结论： 1.青蒿琥酯与舒氨西林联合使用对CLP模型大鼠和小鼠均具有显著保护作用，其效果优于单独使用两种药物； 2.青蒿琥酯联合舒氨西林对啮齿类CLP模型动物的保护作用可能与其降低动物血中的细菌和LPS水平、抑制炎症介质释放、减轻重要脏器的损伤有关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明:中英文缩写索引

声明

前 言

第一节 啮齿类动物CLP模型的建立

材料与方法

实验结果

第二节 青蒿琥酯对啮齿类CLP模型动物的保护作用

材料与方法

实验结果

第三节青蒿琥酯对CLP模型小鼠保护作用的机制研究

材料与方法

实验结果

全文讨论

全文结论

致 谢

参考文献

文献综述 脓毒症动物模型

研究生期间发表的文章