淋巴毒素A基因多态性与慢性阻塞性肺疾病的关系

摘要

背景:慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是以气流受限为特征的慢性呼吸系统疾病，慢性气道炎症是COPD的病理基础，炎症因子在COPD的发生和发展中起重要作用。研究证明COPD是一种多基因疾病，具有遗传易感性。骨质疏松是一种多基因调控的骨代谢性疾病，也具有明显的遗传倾向。近来研究证实，COPD继发的骨质疏松患病率明显高于同龄健康人，说明COPD和骨质疏松两者之间存在某种联系。既然遗传因素在这两种疾病的发生过程中都有作用，有必要对COPD病人并发骨质疏松的遗传因素进行进一步探索。了解哪些COPD病人更易于继发骨质疏松，对于CODP病人的个体化治疗具有重要意义。淋巴毒素A(LTA)是一种重要的炎症介质，参与调控B淋巴细胞、T淋巴细胞的免疫调控和局部炎症反应。同时慢性炎症反应也是骨质疏松的原因之一。因此本研究拟通过中国北方汉族健康个体和COPD患者LTA基因型分析，探讨LTA基因多态性与慢性阻塞性肺疾病易感性、严重程度及骨质疏松的关系。 目的：了解中国北方汉族COPD患者LTA基因多态性与COPD遗传易感性及其发展进程、COPD患者并发OP的关系，对揭示汉族人群COPD的发生发展机制提供理论基础。从而对于指导临床治疗、预测预后提供一个新的思路。 方法： 1.病例组为163例COPD患者，对照组为随机抽样的163例健康人。在163例COPD患者中有122例患者进行肺功能检查并进行了严重程度的分级，此外，该样本中有101名患者进行了骨质疏松测定。 2.DNA的提取采用酚一氯仿法从病人和对照的外周血中提取基因组DNA。 3.tSNP的选择参考序列取自人类单体型计划数据库Chr6_31647542-31650100)，共2959bp，采取Tag SNP Picker程序确定rs2844482(S1)、rs2071590(S2)、rs2239704(S3)、rs2229094(S5)、rs1041981(S6)作为tSNP用于基因型分析，另外增加了一个已知功能SNP[rs909253(S4)]进行基因型分析。 4.基因型分析采用PCR直接测序法。采用Primer3软件设计引物，采用降落时PCR对目的片段进行扩增，PCR产物直接测序，测序文件用Codon Code Aligner软件读取，直接从测序峰图确定等位基因的基因型。 5.用x2检验对照组人群各基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡，以判断所选人群是否存在基因型或等位基因的分布偏差，从而确定其对整体人群的代表性。对于危险度的估计分析，采用非条件logistic回归模型计算比数比(Odds Ratios，OR)及95％可信区间(Confidential Intervals，CI)。所有统计皆采用SNPanlyzer6.0软件进行分析。检验显著性水准均采用α=0.05。 结果： 1.COPD病人组与对照组所有标本均进行了基因型分型，只有少量样本分型未成功，所有重复分型结果均与原结果相符。经卡方检验，健康对照组LTA6个SNP基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(p>0.05)；病人组3个SNP Hardy-Weinberg检验不平衡。 2.LTA6个SNP基因型频率在COPD病人组与对照组之间均无显著性差异。 3.根据肺功能损害的严重程度将病人组中122名COPD病人分成轻、中、重、极重(死亡)四组，轻度和中重度组(中度、重度和极重度组)比较发现：rs2071590，rs2239704，rs909253，rs1041981基因型分布频率和等位基因分布频率存在明显差异。rs2071590 SNP呈隐性模式；rs909253，rs1041981 SNP呈显性模式；rs2239704SNP呈共显性模式。 4.LTA6个SNP基因型频率在COPD病人合并骨质疏松组与COPD病人未合并骨密度组之间均无显著性差异。 结论： 1.本研究结果表明，中国北方汉族LTA基因存在明显基因多态性，LTA的基因多态性与COPD的易感性无关。 2.本研究结果表明，在常见危险因素如年龄，吸烟及病程相当的情况下，COPD患者病情是否由轻度迅速进展到中度及重度以上，与LTA基因的多态性存在明显的相关性。因此LTA可能是影响COPD进程的重要因素之一。 3.本实验发现LTA的基因多态性与COPD患者并发骨质疏松的风险无明显相关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩写一览表

声明

前 言

第一部分淋巴毒素A基因多态性与COPD易感性的关系

材料与方法

结果

讨 论

第二部分淋巴毒素A基因多态性与COPD严重程度的关系

材料与方法

结果

讨 论

第三部分淋巴毒素A基因多态性与COPD合并骨质疏松的关系

材料与方法

结果

讨 论

全文结论

展 望

致 谢

参考文献

照片及测序峰图

文献综述慢性阻塞性肺疾病合并骨质疏松的基因多态性研究现状

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